小鼠ES细胞条件培养基对绵羊类胚胎干细胞克隆、传代的影响

作     者：白昌明 王新庄 闫颖颖 和小娥 张静芳 BAI Chang-ming;WANG Xin-zhuang;YAN Ying-ying;HE Xiao-e;ZHANG Jing-fang

作者机构：河南农业大学牧医工程学院郑州450002 中国科学院动物研究所北京100101 西北农林科技大学动物医学院杨凌712100 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2009年第40卷第9期

页      面：1327-1332页

核心收录：

学科分类：08[工学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090501[农学-动物遗传育种与繁殖] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：河南农业大学人才引进基金 

主　　题：绵羊类ES细胞 小鼠ES细胞条件培养基 自我更新 

摘      要：本研究以无血清培养基为基础培养液,旨在探求小鼠ES细胞条件培养液(ESCCM)和2种不同饲养层对绵羊类ES细胞分离、克隆效率的影响。绵羊内细胞团从胚胎中分离得到后,分别以小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)和绵羊胎儿成纤维细胞(SEF)为饲养层进行培养。结果在MEF饲养层上,绵羊类ES细胞在ESCCM新培养系统中可稳定传至第10代,而使用基础培养液最多传至5代。而在SEF饲养层上,绵羊类ES细胞在ESCCM新培养系统中仅能传至3代。表明使用ESCCM和MEF能促进绵羊类ES细胞的分离和克隆。对类ES细胞进行核型分析、AKP染色及体外分化能力检测,证实所分离的类ES细胞符合ES细胞的主要特征,而且发现这些类ES细胞可以表达胚胎干细胞关键转录因子Nanog。结果表明,ESCCM可显著提高绵羊类ES细胞的分离克隆效率,原因可能是小鼠ES细胞在生长过程中可能分泌某些重要的细胞因子,从而达到促进绵羊ES细胞增殖的作用。且MEF比SEF更适合于绵羊类ES细胞的分离和传代。