游仆虫中心蛋白在大肠杆菌中的高效表达和多克隆抗体制备

作     者：贺晓静 丰九英 王伟 柴宝峰 杨斌盛 梁爱华 

作者机构：山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室太原030006 

出 版 物：《动物学报》 (ACTA ZOOLOGICA SINICA)

年 卷 期：2004年第50卷第3期

页      面：447-451页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (No .3 0 2 70 2 0 4 3 0 3 0 0 3 8)~~ 

主　　题：游仆虫 中心蛋白 GST亲和纯化 多克隆抗体 大肠杆菌 

摘      要：中心蛋白是一种在微管组织中心的复制和分离中起着重要作用的蛋白质。为了进一步进行中心蛋白结构和功能的研究 ,我们克隆了单细胞真核生物游仆虫中心蛋白基因并构建了重组表达质粒pGEX 6P EoCen ,其在大肠杆菌BL2 1中经IPTG诱导后获得了大量的可溶性表达 ,融合蛋白表达水平达到了细菌总蛋白的 32 6 %。GST抗体进行Westernblotting检测结果为阳性。经GST亲和层析和superdex 75凝胶层析后得到 90 %以上电泳纯的蛋白。用纯化后的蛋白免疫大鼠产生抗血清 ,经ELISA检测抗体效价达 1∶2 5 6