口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达
Construction of Recombinant Plasmid for Fusion Expression of Foot and Mouth Disease Virus 2B Gene and Green Fluorescent Protein Gene作者机构:吉林大学畜牧兽医学院长春130062 军事医学科学院军事兽医研究所长春130062
出 版 物:《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)
年 卷 期:2008年第21卷第9期
页 面:756-758页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程(可授工学、理学、医学学位)] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0703[理学-化学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金:军事医学科学院科技创新基金资助项目 吉林省科技厅科技发展计划项目(20050549)
摘 要:目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。