口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达

作     者：崔丽瑾 王兴龙 梅英武 任林柱 闫广谋 张辉 郎需龙 段小宇 路浩 CUI Li-jin, WANG Xing-long, MEI Ying-wu, et al (College of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China)

作者机构：吉林大学畜牧兽医学院长春130062 军事医学科学院军事兽医研究所长春130062 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2008年第21卷第9期

页      面：756-758页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0703[理学-化学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：军事医学科学院科技创新基金资助项目 吉林省科技厅科技发展计划项目(20050549) 

主　　题：口蹄疫病毒 2B基因 绿色荧光蛋白 融合表达 

摘      要：目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。