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电刺激疑核影响大鼠机体细胞因子分泌的研究

电刺激疑核影响大鼠机体细胞因子分泌的研究

口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达

全国动物生理生化第九次学术交流会

作者：梅英武杨占清刘芬柳巨雄吉林大学畜牧兽医学院

实验用220-280g Wister大鼠,麻醉后于疑核内插入同心圆电极,利用NIHON KOHDEN电刺激仪对动物进行60s的电刺激(波宽5 ms、频率100 HZ、强度100μA);观察电刺激对大鼠机体细胞因子分泌的影响。在电刺激后将动物四组、分别在电刺激后的0．5...

实验用220-280g Wister大鼠,麻醉后于疑核内插入同心圆电极,利用NIHON KOHDEN电刺激仪对动物进行60s的电刺激(波宽5 ms、频率100 HZ、强度100μA);观察电刺激对大鼠机体细胞因子分泌的影响。在电刺激后将动物四组、分别在电刺激后的0．5、1、2、3 h摘取胸腺和脾脏,并检查电刺激的正确性;把实验中未刺中疑核的动物作为对照组;利用荧光定量PCR的方法测定胸腺中TGF-β

关键词：

来源： cnki会议评论

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中国生物制品学杂志 2008年第9期21卷 756-758页

作者：崔丽瑾王兴龙梅英武任林柱闫广谋张辉郎需龙段小宇路浩吉林大学畜牧兽医学院长春130062 军事医学科学院军事兽医研究所长春130062

目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光... 详细信息

目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。

关键词：口蹄疫病毒 2B基因绿色荧光蛋白融合表达

电刺激大鼠疑核对胸腺中胸腺素和TGF-β mRNA水平的影响

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吉林农业大学学报 2008年第2期30卷 184-187页

作者：梅英武杨占清王玮尹秀玲柳巨雄吉林大学农学部畜牧兽医学院长春130062 河北北方学院张家口075031

通过急性电刺激大鼠疑核,利用Real-time PCR方法研究了胸腺中胸腺素、TGF-βmRNA在刺激前后的变化规律。结果表明:急性电刺激大鼠疑核后,胸腺中胸腺素与内参的比值从(1.46±0.98)×10-6降低至(2.65±0.31)×10-7,TGF-βmRNA从(3.67±0.... 详细信息

通过急性电刺激大鼠疑核,利用Real-time PCR方法研究了胸腺中胸腺素、TGF-βmRNA在刺激前后的变化规律。结果表明:急性电刺激大鼠疑核后,胸腺中胸腺素与内参的比值从(1.46±0.98)×10-6降低至(2.65±0.31)×10-7,TGF-βmRNA从(3.67±0.86)×10-6降低至(1.92±0.66)×10-7,电刺激组mRNA水平明显低于假刺激对照组。研究结果提示,疑核对大鼠胸腺组织的功能有重要的调节作用。

关键词：大鼠神经免疫调节电刺激疑核

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医学院生物化学实验教学改革探索

科教导刊 2020年第25期 55-56页

作者：梅英武程苗苗焦灿郑州大学基础医学院河南郑州450001

生物化学是多种学科,特别是医学的一个重要基础课程,其基本理论和技术已经渗透至医学的各个领域,其中包括病理诊断以及治疗手段等方面;另外生物化学在多个专业培养体系中也起着中枢纽带的作用,其基础理论将生物学、药学、医学、化学等... 详细信息

生物化学是多种学科,特别是医学的一个重要基础课程,其基本理论和技术已经渗透至医学的各个领域,其中包括病理诊断以及治疗手段等方面;另外生物化学在多个专业培养体系中也起着中枢纽带的作用,其基础理论将生物学、药学、医学、化学等学科有机融合在了一起.但是在长期的教学中,医学生物化学实验一直存在着很严重的问题,如实验不连贯、学生无兴趣、与实际工作脱节等等.通过长期对医学生物化学实验教学的实践、总结与思考,并结合其他院校已经开展的生物化学实验内容,作者从实验设计改革、实验教学内容和方式改革几个方面进行研究,以期探索出更好的生物化学实验教学方式.

关键词：生物化学综合类实验综合临床检验实验教学改革

口蹄疫病毒YN株VPl-2A基因的克隆及遗传变异分析

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吉林农业大学学报 2006年第4期28卷 444-446页

作者：任林柱王兴龙段小宇梅英武刘锴王学理吉林大学畜牧兽医学院长春130062 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所长春130062

以口蹄疫病毒YN株RNA为模板，用设计的特异引物RT—PCR扩增出大小为1055bp的基因片段，并对PCR产物克隆测序进行序列分析。结果表明：供试病毒的VP1-2A基因的核苷酸序列与参考毒株的同源性为77．65％-93．00％，对应的氨基酸序列同源性... 详细信息

以口蹄疫病毒YN株RNA为模板，用设计的特异引物RT—PCR扩增出大小为1055bp的基因片段，并对PCR产物克隆测序进行序列分析。结果表明：供试病毒的VP1-2A基因的核苷酸序列与参考毒株的同源性为77．65％-93．00％，对应的氨基酸序列同源性为87％-97％。

关键词：口蹄疫病毒 VP1-2A基因克隆遗传变异

微小RNA-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-20S细胞增殖及分化的影响

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中华实验外科杂志 2017年第2期34卷 271-273页

作者：李成梅英武吴留源关红亚谷晨熙李月白王义生郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系 450001

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-2OS细胞增殖及分化的影响。方法体外培养骨肉瘤细胞株U-2OS和人成骨细胞hFOB1.19。人骨肉瘤细胞株U-2OS随机分为3组：空白组（Blank）：细胞仅转染入试剂脂质体；阴性对照组... 详细信息

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-2OS细胞增殖及分化的影响。方法体外培养骨肉瘤细胞株U-2OS和人成骨细胞hFOB1.19。人骨肉瘤细胞株U-2OS随机分为3组：空白组（Blank）：细胞仅转染入试剂脂质体；阴性对照组（NC）：细胞转染无关序列；miR-329组：细胞转染miR-329。实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测人骨肉瘤U-2OS细胞和人成骨细胞hFOB1.19中miR-329和E2F1 mRNA表达。细胞计数试剂盒（CCK-8）检测3组人骨肉瘤U-2OS细胞在48、72、96 h的增殖水平。转染48 h后收集细胞，采用Western blot法检测3组人骨肉瘤U-2OS细胞中E2F1和核心结合蛋白因子2（Runχ2）、骨桥蛋白（OPN）、维甲酸α受体（RARα）蛋白的表达。结果miR-329和E2F1 mRNA在人骨肉瘤U-2OS细胞、人成骨细胞中的表达水平分别为0.736±0.013、1.215±0.026和1.329±0.015、0.894±0.017，人骨肉瘤细胞中miR-329 mRNA表达水平明显低于人成骨细胞（P＝0.008），E2F1 mRNA表达水平明显高于人成骨细胞（P＝0.003）。细胞转染后，Blank组、NC组和miR-329组在48、72、96 h细胞增殖水平分别为2.635±0.214、2.584±0.107和1.319±0.135，2.912±0.152、2.826±0.165和1.136±0.214，3.109±0.143、3.095±0.129和1.153±0.172，miR-329组人骨肉瘤细胞的增殖水平明显低于空白组和阴性对照组，且随时间延长其抑制人骨肉瘤细胞增殖的作用逐渐增强，差异均有统计学意义（F组间＝4.351，P＝0.036；F时间＝2.366，P＝0.043）。miR-329组E2F1的蛋白表达量明显低于空白组和阴性对照组，Runχ2、OPN、RARα蛋白表达量明显高于空白组和阴性对照组，差异有统计学意义（F组间＝9.037，P＝0.025；F组内＝7.779，P＝0.028）。结论miR-329能够通过下调E2F1表达抑制人骨肉瘤U-2OS细胞的增殖，并促进其成骨分化。

关键词：微小RNA-329 E2F1 骨肉瘤增殖分化

冷应激反应下猪脂肪组织瘦素、脂联素、抵抗素mRNA表达水平的研究

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冷应激反应下猪脂肪组织瘦素、脂联素、抵抗素mRNA表达水平的研究

口蹄疫病毒WFL株基因组全长cDNA的克隆及序列分析

全国动物生理生化第十次学术交流会

作者：刘芬王玮杨占清崔伟梅英武张雪莉王凯柳巨雄胡仲明吉林大学畜牧兽医学院

动物冷应激是制约北方畜牧养殖业发展的主要因素之一,但也有研究发现,适度冷应激可以改善畜禽肉质品质。因此,研究冷应激机理和冷应激条件下脂肪代谢规律对指导寒区畜牧业生产具有重要意义。为探索冷应激对猪脂肪代谢的影响,本实验应用...

动物冷应激是制约北方畜牧养殖业发展的主要因素之一,但也有研究发现,适度冷应激可以改善畜禽肉质品质。因此,研究冷应激机理和冷应激条件下脂肪代谢规律对指导寒区畜牧业生产具有重要意义。为探索冷应激对猪脂肪代谢的影响,本实验应用荧光定量

关键词：

来源： cnki会议评论

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中国预防兽医学报 2007年第1期29卷 22-26页

作者：任林柱王兴龙李莉李晓艳段小宇梅英武刘锴王学理吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062

根据口蹄疫病毒基因组的结构特点以及GenBank上公布的全序列,用DNAMAN分别设计了涵盖整个基因组序列的3对引物,从接种口蹄疫病毒WFL株的细胞培养液中提取了病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法和RACE法分别扩增了3条基因片段,并将扩增片段分别... 详细信息

根据口蹄疫病毒基因组的结构特点以及GenBank上公布的全序列,用DNAMAN分别设计了涵盖整个基因组序列的3对引物,从接种口蹄疫病毒WFL株的细胞培养液中提取了病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法和RACE法分别扩增了3条基因片段,并将扩增片段分别与T载体连接,在体外分别进行了5'半分子和3'半分子的构建。最后将5'半分子和3'半分子连接成基因组全长cDNA分子。经PCR鉴定、酶切鉴定及全长cDNA测序,证实成功构建了口蹄疫病毒WFL株基因组全长cDNA分子。序列分析结果表明,供试口蹄疫病毒基因组全长为8155nt,5'UTR长1059nt;具有一个大的读码框,其核苷酸长度为6969nt,包括201aa的前导蛋白基因和2122aa的聚合蛋白基因;3'UTR长127nt,包括34nt的poly(A)。

关键词：口蹄疫病毒基因组全长cDNA

MUC1、MUC2 mRNA在炎症性肠病大鼠肠黏膜细胞表达规律的研究

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MUC1、MUC2 mRNA在炎症性肠病大鼠肠黏膜细胞表达规律的研究