青稞类钙调素蛋白基因CML19的克隆、序列分析及原核表达

作     者：韦泽秀 原红军 扎桑 王玉林 徐齐君 曾兴权 尼玛扎西 WEI Zexiu;YUAN Hongjun;ZHASANG;WANG Yulin;XU Qijun;ZENG Xingquan;NIMAZHAXI

作者机构：西藏自治区农牧科学院农业资源与环境研究所拉萨850002 省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室拉萨850002 西藏自治区农牧科学院农业研究所拉萨850002 西藏自治区农牧科学院拉萨850002 

出 版 物：《西北农业学报》 (Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica)

年 卷 期：2018年第27卷第7期

页      面：963-969页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：西藏财政专项(2017CZZX001/2) 西藏科技重大专项(Z2016B01N01)~~ 

主　　题：青稞 类钙调素蛋白 CML19 序列分析 原核表达 

摘      要：根据鉴定得到青稞类钙调素蛋白基因CML19的序列设计引物,以青稞叶片的cDNA为模板,扩增得到目的片段,对目的基因序列进行鉴定和分析,进一步构建该基因的原核表达载体pET28a-CML19,转入大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导外源蛋白质表达并检测。结果表明,扩增得到CML19的CDS序列全长为447bp,编码的蛋白质含有148个氨基酸,分子质量为16.46ku,理论等电点(pI)为4.40,总平均亲水性(GRAVY)为-0.176,不稳定系数为49.59,存在典型的EF手结构域;系统进化分析表明,青稞CML19与山羊草具有较近的亲缘关系;原核表达蛋白结果显示,重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中。初步阐明青稞CML19基因的序列特征,为进一步制备抗体、探讨CML19基因的功能奠定基础。