CCKBR蛋白的生物信息学分析、原核表达及抗体制备

作     者：常江 赵柯 李畅 杨阿林 关玉婷 李萌 张嵩 胡盼 任洪林 柳增善 CHANG Jiang;ZHAO Ke;LI Chang;YANG Alin;GUAN Yuting;LI Meng;ZHANG Song;HU Pan;REN Honglin;LIU Zengshan

作者机构：吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第9期

页      面：10-14,242页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：中国博士后科学基金特别资助项目(2015T80312) 吉林省青年科研基金项目(20160520162JH) 

主　　题：胆囊收缩素Ⅱ型受体 克隆 原核表达 抗原表位 生物信息学 多克隆抗体 

摘      要：为了获得胆囊收缩素Ⅱ型受体（CCKBR）的多克隆抗体,建立CCKBR的分子水平检测方法,试验克隆了CCKBR基因CDS全序列并采用生物信息学方法分析CCKBR的抗原表位,根据分析结果合成重组CCKBR基因序列进行原核表达并对表达产物分析鉴定,最后制备多克隆抗体并分析抗体的适用性。结果表明：CCKBR基因CDS全序列扩增成功;抗原区域可能位于35-53,160-175,195-215,245-300,347-368,390-430位氨基酸残基;原核表达的目的条带大小为23.9 ku,与预期结果一致,Western-blot检测条带正确;用包涵体免疫新西兰大耳白兔,获得CCKBR的多克隆抗体,Westernblot检测到CCKBR天然蛋白。说明试验表达CCKBR重组蛋白成功,且由该蛋白制备的抗体能检测出CCKBR天然蛋白,可用于CCKBR的进一步研究。