大豆F-box基因Glyma08g11030启动子克隆及植物表达载体构建

作     者：张承琪 王怡 夏成林 于月华 倪志勇 ZHANG Cheng-qi, WANG Yi, XIA Cheng-lin, YU Yue-hua, NI Zhi-yong

作者机构：新疆农业大学农学院新疆乌鲁木齐830052 

出 版 物：《大豆科学》 (Soybean Science)

年 卷 期：2018年第37卷第2期

页      面：179-184页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(31660295) 中国博士后科学基金(2015M582741) 新疆维吾尔自治区科研创新项目(XJGRI2017063) 

主　　题：大豆 启动子 克隆 植物表达载体 

摘      要：本研究以大豆Williams 82的基因组DNA为原始材料,根据前期预测的Glyma08g11030启动子序列用DNAMAN8.0设计引物,通过常规PCR方法克隆获得了Glyma08g11030基因上游长度为3 000 bp的启动子序列。在PlantCARE植物启动子区域在线预测网站上查询,预测的结果显示Glyma08g11030启动子序列里含有数量众多、功能各异的顺式作用元件。其中以TATA-box和CAAT-box这两个基本的顺式作用元件最多,此外还有许多与应答相关的顺式作用元件,如干旱、热、光、激素等。根据这些顺式作用元件在Glyma08g11030启动子序列中的位置对启动子序列进行截短并分别设计引物,采用PCR方法成功截出了3段长度分别为2 492,1 185和342bp的启动子序列,将3段序列替换pCAMBIA3301载体双酶切出的CaMV35S启动子序列,并构建了3个启动子序列驱动GUS植物融合表达载体,从而得到含不同顺式作用元件的启动子序列。研究结果将为以后分析Glyma08g11030启动子的功能和作用机理提供前期准备。