口蹄疫病毒O/China/99株VP1基因植物种子特异性表达载体的构建及农杆菌的导入
Construction of plant seed-specific expression vector with VP1 of FMDV O/China/99 and transfer to Agrobacterium tumefaciens作者机构:中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046
出 版 物:《中国兽医科技》 (Chinese Journal of Veterinary Science and Technology)
年 卷 期:2005年第35卷第6期
页 面:413-417页
核心收录:
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:国家高技术研究发展计划(863)项目(2001AA213071)
主 题:口蹄疫病毒 植物组成型表达载体 种子特异性表达载体 根癌农杆菌 VP1基因 疫苗
摘 要:根据植物组成型表达质粒pBin438的限制性酶切位点及FMDVVP1的核苷酸序列设计并合成引物,从种子特异性启动子7S质粒pU82质粒中扩增7S启动子,经HindⅢ和BamHⅠ酶切,与经同样双酶切的植物组成型表达载体pBin438大片段连接,经酶切、PCR鉴定及序列分析,种子特异性表达载体p7SBin438构建完成。从FMDVVP1基因的pGEMVP1质粒中扩增VP1基因,经BamHⅠ和SalⅠ双酶切后,与p7SBin438质粒酶切后的大片段连接,经酶切、PCR及测序鉴定,FMDVVP1基因已置于种子特异性启动子7S下游,成功构建了FMDVVP1基因的种子特异性表达载体p7SBin438VP1。通过三亲交配法,将表达载体p7SBin438VP1导入根癌农杆菌,为研究FMD可饲疫苗奠定了基础。