稳定高表达ANO1对Hep-2细胞生物学性状的影响

作     者：李雅冬 张劲松 杨凯 张福军 陈睿 洪苏玲 LI Ya-dong;ZHANG Jin-song;YANG Kai;ZHANG Fu-jun;CHEN Rui;HONG Su-ling

作者机构：重庆医科大学附属第一医院颌面外科重庆400016 重庆医科大学附属第一医院耳鼻喉头颈外科重庆400016 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2012年第38卷第5期

页      面：952-956,F0003页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：重庆市科委自然科学基金计划资助课题(cstc2012jjA10039) 重庆市卫生局医学科研计划项目资助课题(2011-2-013) 重庆医科大学附属第一医院留学归国人员科研启动基金项目资助课题(2010) 

主　　题：头颈部肿瘤 ANO1 Hep-2细胞 

摘      要：目的:建立外源性ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,并观察其对Hep-2细胞生物学性状的影响。方法:设计引物,提取头颈鳞癌患者的临床标本DNA,并以其为模板行PCR,得到ANO1基因序列片段,将ANO1片段插入到PSG-5质粒,转染入Hep-2细胞株,将稳定高表达ANO1的Hep-2细胞株设为实验组,空白质粒转染的Hep-2细胞株设为对照组。并利用Western blotting法和免疫荧光实验检测已转染细胞,观察ANO1的表达情况。利用Boyden小室侵袭实验和黏附实验检测Hep-2细胞生物学性状的变化。结果:成功构建含ANO1片段的pSG-5质粒,Western blotting法检测结果显示,各组均出现目的条带,实验组的相对分子质量为100 000处条带明显较浓。间接免疫荧光实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞内显现出亮绿色荧光,而空白质粒转染的Hep-2细胞内仅有较暗、较浅的绿色荧光。Boyden小室侵袭实验和黏附实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞穿膜细胞百分比和黏附细胞百分比均明显高于对照组,两组结果比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:成功建立了ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,稳定高表达ANO1提高了Hep-2细胞的迁移能力。