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猪链球菌2型分选酶srtBCD基因敲除株的构建及其生物学特性分析

Construction and in vitro assay of the sortase BCD geneknock-out mutant of Streptococcus suis 2

作     者:陈红娜 廖辉 王长军 潘秀珍 唐家琪 Hongna Chen;Hui Liao;Changjun Wang;Xiuzhen Pan;Jiaqi Tang

作者机构:南京军区军事医学研究所南京210002 南京医科大学基础医学院南京210029 

出 版 物:《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期:2011年第51卷第3期

页      面:386-392页

核心收录:

学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金项目(30730081 30972638 81071317) 江苏省自然科学基金资助项目(BK2009042 BK2010025 BK2010114 BK2010113) 南京军区医学科技创新课题(09Z040 07Z045)~~ 

主  题:猪链球菌2型 sortase BCD 基因敲除 粘附 毒力 

摘      要:【目的】阐明分选酶srtBCD基因在猪链球菌2型致病过程中的作用。【方法】利用同源重组原理构建中间为壮观霉素、两侧为srtBCD基因上下游片段的重组质粒,将构建好的质粒电转化入猪链球菌感受态,筛选srtBCD缺失的突变株,并通过组合PCR和逆转录PCR对其进行验证。生物学功能实验研究srtBCD突变株和野毒株05Z33在生长速率、粘附、毒力等方面的差异。【结果】组合PCR和逆转录PCR结果均证实srtBCD突变株构建成功,体外实验结果显示srtBCD缺失后细菌的生长速率减慢,与Hep-2上皮细胞的粘附率明显降低,小鼠毒力实验数据表明突变株毒力无明显变化。【结论】猪链球菌2型srtBCD基因与细菌的粘附能力有关,为进一步研究猪链球菌2型的致病机理奠定基础。

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