一株赤潮甲藻转录单元内间隔区(ITS)和5.8S rDNA序列的克隆

作     者：张宝玉 王广策 张炎 吕颂辉 齐雨藻 邹景忠 曾呈奎 

作者机构：中国科学院海洋研究所 暨南大学水生生物研究所广东广州510632 

出 版 物：《海洋科学》 (Marine Sciences)

年 卷 期：2004年第28卷第12期

页      面：49-53页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30170499 40476059) 中国科学院知识创新重要方向性项目(KZCX2-211) 国家973计划项目(2001CB409701) 

主　　题：赤潮 塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamatense) 转录单元内间隔区(ITS) 5.8S PCR 克隆 

摘      要：为解决分子生物学方法中因纯化的新鲜材料不足而限制实验进展的情况,采用改进的克隆方法将目的DNA片断保存在菌株中。首先应用改进的DNA提取方法从赤潮甲藻塔玛亚历山大藻(Alexandriumtamarense)中提取总核酸,以提取的DNA为模板,优化PCR扩增条件,获得转录单元内间隔区(ITS)片段。将获得的ITS片段经SalI和PstI双酶切后与同样经过双酶切后的质粒载体pBluscriptSK+连接,转化受体菌XL1-Blue,克隆该DNA片段。该克隆方法简单易行,克隆效率完全可以满足一般实验要求。该克隆技术的应用为随时获得目的DNA提供一条途径。