牛乳铁蛋白对脂多糖体外诱导大鼠空肠上皮细胞炎症的抑制作用及机制

作     者：孔祥永 郭婧 杨梅 王瑞娟 封志纯 Kong Xiangyong;Guo Jing;Yang Mei;Wang Ruijuan;Feng Zhichun

作者机构：陆军总医院附属八一儿童医院极早产儿监护科100700 南方医科大学陆军总医院临床医学院100700 陆军总医院263临床部儿科101149 

出 版 物：《中华实用儿科临床杂志》 (Chinese Journal of Applied Clinical Pediatrics)

年 卷 期：2017年第32卷第7期

页      面：539-542页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81471492 81170603) 

主　　题：牛乳铁蛋白 空肠上皮细胞 增殖 炎症 

摘      要：目的探讨牛乳铁蛋白（bLF）在体外对大鼠空肠上皮细胞株（IEC-6）细胞增殖和对脂多糖（LPS）诱导的细胞炎性反应的影响及机制。方法体外培养IEC-6细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度bLF时IEC-6细胞的活性，5-溴脱氧尿苷（Brdu）标记检测bLF对细胞增殖能力的影响，荧光定量PCR及酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的mRNA水平，Western blot检测bLF对LPS诱导的炎症信号通路中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）及核因子-κB（NF-κB）水平。结果bLF在体外可促进IEC-6细胞活性和增生能力，并呈浓度依赖效应（F＝3.825、5.861，均P〈0.05），当处理质量浓度为100 mg/L时，IEC-6细胞活性和增殖能力逐渐增强（q＝5.240、3.765，均P〈0.05）。应用100 mg/L质量浓度的bLF预处理IEC-6细胞可明显降低IL-1β、IL-6及TNF-α 的mRNA表达水平（q＝14.28、10.12、16.45，均P〈0.001），并降低IL-6和TNF-α蛋白的表达（q＝15.06、6.74，均P〈0.001）。与单独LPS组相比，应用100 mg/L质量浓度的bLF预处理IEC-6细胞可使MAPK/NF-κB通路的激活水平下降（q＝12.96、18.54，均P〈0.001）。结论bLF在体外可促进大鼠IEC-6细胞活性及增殖能力，并通过抑制MAPK/NF-κB信号通路起到抑制LPS诱导的炎性反应的作用。