干扰TIP47基因对奶山羊乳腺上皮细胞脂滴形成及相关基因表达的影响
Effects of RNAi Expression of TIP47 on Lipid Droplet Formation and the Expression of Related Genes in Goat （Capra hircus） Mammary Epithelial Cells作者机构：西北农林科技大学动物科技学院/陕西省农业分子生物学重点实验室 浙江理工大学生命科学学院
出 版 物：《农业生物技术学报》 (Journal of Agricultural Biotechnology)
年 卷 期：2017年第25卷第2期
页 面：250-257页
核心收录：
基 金：国家转基因生物新品种培育科技重大专项(No.2014ZX08009-051B) 国家公益性行业(农业)科研专项(No.201103038)
主 题：奶山羊 47 kD尾部相互作用蛋白基因(TIP47) RNA干扰 乳腺上皮细胞
摘 要：47 k D尾部相互作用蛋白(tail-interacting protein 47,TIP47)在脂滴形成与代谢过程中具有重要调控作用,研究其在乳脂滴形成过程中的作用对调控羊(Capra hircus)乳品质具有重要意义。本研究采用BLOCK-i T小发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)腺病毒(Adenovirus)干扰系统,根据奶山羊TIP47基因序列,在线设计并合成干扰sh RNA。将有效sh RNA序列构建载体,并在293A细胞中包装腺病毒。利用腺病毒载体干扰乳腺上皮细胞TIP47基因表达后,检测胞内脂肪酸代谢基因及脂滴的变化。结果表明,筛选到有效sh RNA序列并获得高滴度TIP47基因的干扰腺病毒Ad-sh RNA-888。Ad-sh RNA-888感染山羊原代乳腺上皮细胞后发现,TIP47 m RNA表达量下调61%(P0.01)。干扰TIP47基因的表达后,甘油三酯水解酶基因(adipose triglyceride lipase,ATGL)下调了15%,而脂肪酸合酶基因(fatty acid synthase,FASN)和激素敏感脂酶基因(hormone-sensitive lipase,HSL)分别上调1.77(P0.05)和2.8(P0.01)倍,硬脂酰辅酶A去饱和酶基因(stearoyl-Co A desaturase,SCD)表达水平变化不显著。油红O结果显示干扰TIP47基因可以降低细胞脂滴(lipid droplets,LD)的形成。本研究对TIP47基因进行干扰,发现其在奶山羊乳腺细胞脂滴形成过程中有重要调控作用,为进一步研究TIP47基因对脂滴代谢的影响提供一定的理论依据。
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