异基因骨密质来源间充质干细胞对小鼠急性GVHD的防治作用及其机制研究

作     者：乔淑凯 郭晓楠 张雅丽 任金海 王颖 张静楠 李杨 QIAO Shu-Kai;GUO Xiao-Nan;ZHANG Ya-Li;REN Jin-Hai;WANG Ying;ZHANG Jing-Nan;LI Yang

作者机构：河北医科大学第二医院血液科石家庄050000 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2016年第32卷第11期

页      面：1672-1677页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

主　　题：间充质干细胞 造血干细胞移植 移植物抗宿主病 调节性T细胞 趋化因子受体 

摘      要：目的:明确异基因骨密质来源的间充质干细胞(CB-MSCs)是否能有效防治急性GVHD,并进一步探讨其可能的治疗机制。方法:采用骨密质碎片法从C57BL/6(H-2b)小鼠分离和扩增MSCs。通过构建小鼠allo-HSCT后GVHD模型:雌性供鼠C57BL/6(H-2b)→雄性受鼠BALB/c(H-2d),然后观察CB-MSCs移植对GVHD的影响。本实验小鼠共分为4组:1单纯照射组;2GVHD组;3GVHD^+MSCs组;4正常对照组。在GVHD诱导后不同时间点观察各组小鼠生存率、体重变化和临床GVHD积分;应用ELISA方法检测各组小鼠外周血细胞因子(TNF-α、IFN-γ和IL-4)和趋化因子(CCL5、CXCL9和CXCL10)浓度;应用流式细胞术检测各组小鼠外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞(Treg细胞)百分比和CD3^+T细胞表面趋化因子受体CXCR3、CCR5和CCR7的表达。此外,我们还应用实时定量逆转录PCR(Real-time RT-PCR)方法检测了各组小鼠骨髓中T-bet和GATA-3的mRNA表达水平。结果:CB-MSCs能显著提高GVHD小鼠生存率、减少其体重缺失,并显著降低临床GVHD积分;CB-MSCs对GVHD的防治作用可能与降低外周血TNF-α、IFN-γ、CCL5、CXCL9和CXCL10浓度,增加Treg细胞百分比,下调T细胞表面CXCR3、CCR5的表达和上调CCR7的表达有关。此外,诱导骨髓Th1/Th2平衡向抗炎的Th2极倾斜可能也是CB-MSCs对GVHD发挥治疗作用的机制之一。结论:异基因CB-MSCs显著增加了GVHD小鼠生存率。其治疗机制可能与CB-MSCs能够减少炎性细胞因子和趋化因子的释放,诱导Treg的生成,调控T细胞表面趋化因子受体的表达,以及纠正Th1/Th2的失衡有关。