假肠膜明串珠菌D-乳酸脱氢酶基因的克隆与表达

作     者：王希庆 武丽达 张明磊 王刚 陈光 WANG Xiqing;WU Lida;ZHANG Minglei;WANG Gang;CHEN Guang

作者机构：吉林农业大学生命科学学院长春130118 吉林中粮生化有限公司玉米深加工国家工程研究中心长春130033 

出 版 物：《吉林农业大学学报》 (Journal of Jilin Agricultural University)

年 卷 期：2016年第38卷第5期

页      面：533-537页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：基金项目:吉林省高等学校秸秆综合利用高端科技创新平台[吉高平合字(2014)C-1] 

主　　题：假肠膜明串珠菌 D-乳酸脱氢酶基因 克隆 表达 

摘      要：利用PCR的方法从假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides 1159)的DNA中扩增得到D-乳酸脱氢酶基因,构建重组克隆质粒(pMD19-T-DLDH),转化DH5α进行蓝白斑筛选,得到阳性克隆提取质粒双酶切验证。连接pET-32a表达质粒,构建重组表达质粒,提取质粒双酶切、测序验证,测序结果与原序列基本相符。得到重组表达质粒pET-32-DLDH转化BL21大肠杆菌IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示有明显大小约为19 ku的特异蛋白条带。