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玉米转录因子基因cl-I-2K1和r-2K1的克隆及其对转基因烟草花色形成的影响

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玉米转录因子基因cl-I-2K1和r-2K1的克隆及其对转基因烟草花色形...

作者：王希庆首都师范大学

学位级别：硕士

花青素属黄酮类化合物，是一类非常重要的植物次生代谢产物，它不仅能够影响植物的外观形态(尤其是花的颜色)，而且对植物的代谢生理(尤其是生殖生理)也有重要的作用。在许多高等开花植物中，尤其是在进化上亲缘关系比较近的物种... 详细信息

花青素属黄酮类化合物，是一类非常重要的植物次生代谢产物，它不仅能够影响植物的外观形态(尤其是花的颜色)，而且对植物的代谢生理(尤其是生殖生理)也有重要的作用。在许多高等开花植物中，尤其是在进化上亲缘关系比较近的物种，花青素合成各步骤所需酶的结构基因高度保守。这就意味着，这些植物色素表现式样的不同，可能是因控制这些结构基因表达的调节基因作用的差异所致。 c1与r是两类从玉米中分离到的转录因子基因，C1属MYB转录因子，R属bHLH转录因子，它们之间的协同作用在在花青素合成中起着非常重要的调节作用。后来人们又发现了c1的等位突变基因c1-I，它在相应基因转录方面的调节作用与c1相反：抑制花青素的合成。本实验通过RT-PCR的方法从玉米(2K1-紫)中克隆到两个调节基因，命名为c1-I-2K1和r-2K1，序列分析表明其编码的蛋白分别属于MYB及bHLH家属。通过分子克隆技术，将c1-I-2K1、r-2K1和二者的连接(c1-I-2K1—r-2K1)分别构建到双元表达载体上，并使它们分别置于35S启动子的驱动之下，然后通过农杆菌介导的技术分别对烟草(Nicotiana tabacum，W38)进行了转化，利用组织培养技术再生植株。通过分化植株的生根培养、PCR鉴定和Southern杂交等一系列手段，筛选出阳性植株，移栽到室外观察。结果表明：转c1-I-2K1基因烟草的花呈白色，而其它两种转基因烟草的花色与对照无明显差别，都为粉红色。由此我们可以得到启示：第一，C1-I-2K1蛋白的确能抑制转基因烟草花青素的合成;第二，在高等植物中，有些物种间花青素合成的调控途径可能存在保守性;第三，单独的R-2K1蛋白对转基因烟草的花青素合成无明显作用;第四，R-2K1蛋白可能需要在C1-I-2K1蛋白协同下才会起作用，并且这种作用能抑制C1-I-2K1蛋白对转基因烟草花青素合成的抑制作用;第五，通过转基因的方法来改变植物花色有着明朗的应用前景。

关键词：花青素转录因子 MYB r-2K1 cl-I-2K1

古诗今乐，君当何咏 ——论中国古典诗词艺术歌曲的多维度演绎

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古诗今乐，君当何咏 ——论中国古典诗词艺术歌曲的多维度演绎

作者：王希庆曲阜师范大学

学位级别：硕士

本文从中国古典诗词艺术歌曲的不同风格的划分入手,针对歌曲的特点从歌词、旋律、钢琴伴奏、演唱、以及舞美的辅助作用等出发,阐述如何多维度演绎好这些不同风格的意境深远、内涵深邃的艺术歌曲,以及对演绎好这类艺术歌曲演唱者需具备... 详细信息

本文从中国古典诗词艺术歌曲的不同风格的划分入手,针对歌曲的特点从歌词、旋律、钢琴伴奏、演唱、以及舞美的辅助作用等出发,阐述如何多维度演绎好这些不同风格的意境深远、内涵深邃的艺术歌曲,以及对演绎好这类艺术歌曲演唱者需具备的优秀素质进行研究和讨论。文章共分三部分,第一部分是序言,主要阐述本课题的研究对象与意义;第二部分是本文的主体部分。首先,在第一章中将中国古典诗词艺术歌曲的内涵和外延进行概述,并根据前人的研究结果阐述古典诗词艺术歌曲的各个类型。第二章是论文的核心,即从古典诗词艺术歌曲的各个组成部分以及进行演唱二度创作的创新入手,论述如何演绎好不同创作手法、不同音乐风格的古典诗词艺术歌曲;第三章则是论述演绎这类艺术歌曲演唱者需具备的素质和修养。第三部分是全文的小结。笔者对文章从演唱和演绎者的角度对全文作了一次总结,并希冀通过古典诗词艺术歌曲作品的传唱和传播将中国古典艺术体现的精神内涵、审美价值传播影响至全世界。

关键词：古典诗词艺术歌曲演唱多维度演绎

产高光学纯度D-乳酸保加利亚乳杆菌工程菌的构建及在生物炼制中的应用

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产高光学纯度D-乳酸保加利亚乳杆菌工程菌的构建及在生物炼制中的...

作者：王希庆吉林农业大学

学位级别：硕士

D-乳酸是一种广泛应用于食品、化工、环保、医药等领域的重要合成中间体。随着聚乳酸行业的兴起,D-乳酸需求量逐年增加,当前D-乳酸的工业化生产主要采用化学合成法。但此方法具有污染高,光学纯度低,容易产生消旋体(D/L-乳酸)的弊端,不... 详细信息

D-乳酸是一种广泛应用于食品、化工、环保、医药等领域的重要合成中间体。随着聚乳酸行业的兴起,D-乳酸需求量逐年增加,当前D-乳酸的工业化生产主要采用化学合成法。但此方法具有污染高,光学纯度低,容易产生消旋体(D/L-乳酸)的弊端,不适应可持续发展的要求。利用微生物发酵产D-乳酸,具有无污染,D-乳酸的光学纯度高的特点,相对于化学合成法具有明显的优势。但采用微生物发酵法生产D-乳酸有两个瓶颈问题:(1)成本高:微生物发酵过程中,菌体通常对发酵底物的营养需求较高,导致D-乳酸的生产成本上升;(2)生产效率较低:天然存在具有产D-乳酸能力的菌株较多,例如乳酸菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等。但野生型菌株的产量较低,远不能满足工业化生产的要求。为解决微生物发酵产D-乳酸面临的两个主要问题,本研究对德氏乳杆菌保加利亚亚种进行代谢途径改造,敲除乙酸代谢途径和L-乳酸代谢途径,构建一株高产高光学纯度D-乳酸的工程菌;为进一步降低微生物发酵产D-乳酸的成本,采用来源丰富的木质纤维素资源—玉米秸秆替代葡萄糖作为发酵底物。利用新型催化剂-固体酸对玉米秸秆进行预处理,研究固体酸预处理玉米秸秆的最佳工艺,将预处理的玉米秸秆应用于产D-乳酸的工程菌同步糖化发酵D-乳酸的研究中,实现玉米秸秆转化为高附加值D-乳酸的目的。主要研究结果如下:1.德式乳杆菌保加利亚亚种CICC 21101最适生长条件:温度37℃,pH值为6.0,转速120 rpm;最适产酸条件:温度42℃,接种量5%,初始葡萄糖浓度5%,在最适发酵条件下,菌株D-乳酸产量为35 g/L,光学纯度为87.5%e.e。2.对野生型德式乳杆菌保加利亚亚种进行代谢途径改造,利用乳酸菌专用敲除质粒pGHost 4,对德氏乳杆菌保加利亚亚种CICC 21101 L-乳酸代谢途径和乙酸代谢途径中的关键酶基因L-乳酸脱氢酶基因(ldb0094、ldb0120)、乙酸激酶基因(ack)进行敲除。(1)乙酸激酶基因的敲除:利用本实验室已构建的乙酸激酶基因敲除质粒pGhost-△ack电转化德式乳杆菌保加利亚亚种感受态细胞中,筛选阳性克隆,利用敲除引物pGhost4-Δack-L-F/pGhost4-Δack-R-R PCR进行验证,结果显示乙酸激酶基因成功被敲除,通过高效液相(HPLC)测定工程菌(DS-A)发酵液D-乳酸产量和光学纯度,D-乳酸产量达到35 g/L,光学纯度为90%e.e。(2)L-乳酸脱氢酶基因(ldb0094、ldb0120)的敲除:选取L-乳酸脱氢酶基因(ldb0094、ldb0120)上下游片段,利用重叠PCR对上下游片段进行拼接,构建L-乳酸脱氢酶基因敲除质粒pGhost-△ldh1/pGhost-△ldh2,电转化德式乳杆菌保加利亚亚种(DS-A)感受态细胞中,筛选阳性克隆,并对其基因和发酵产物进行验证,PCR验证结果显示L-乳酸脱氢酶基因成功被敲除;高效液相测定结果显示,敲除L-乳酸脱氢酶基因(ldb0094),工程菌(DS-L1)发酵液中L-乳酸产量和光学纯度明显上升,产量达到29.8 g/L,光学纯度为93.5%e.e,D-乳酸产量和光学纯度明显下降,产量为2.6 g/L;敲除L-乳酸脱氢酶基因(ldb0120),工程菌(DS-L2)D-乳酸产量和光学纯度明显上升,最终D-乳酸产量高达41 g/L,光学纯度为99.5%e.e。3.以粉碎的玉米秸秆为原料,以固体酸为预处理剂,研究其预处理玉米秸秆的最佳工艺,通过单因素和正交实验得到固体酸预处理玉米秸秆最佳工艺:温度120℃、固体酸浓度1.5%、时间80 min、纤维素酶添加量30 FPU/g纤维素,最终转化率为71.06%。利用扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、傅里叶红外光谱(FTIR)对预处理玉米秸秆的结构变化进行测定,扫描电镜测定结果显示固体酸预处理使得玉米秸秆表面由原来光滑规则有序的结构变得粗糙杂乱,产生了大量孔洞;X射线衍射结果表明预处理后玉米秸秆结晶度有所下降,结晶区发生重结晶现象;傅里叶红外光谱结果显示半纤维素和木质素的吸收峰减弱,纤维素吸收峰增强。SEM、XRD、FTIR结果证明了固体酸预处理玉米秸秆具有良好的效果。4.研究了利用预处理后的玉米秸秆替代葡萄糖添加物作为发酵底物时,德式乳杆菌保加利亚亚种CICC 21101和德式乳杆菌保加利亚亚种CICC 21101工程菌DS-L2同步糖化共发酵产D-乳酸的情况,结果显示在MRS+秸秆发酵培养基中秸秆添加量为10%时,D-乳酸的产量达到最高,原菌最高产量为51 g/L,工程菌DS-L2的最高产量为61 g/L,在以秸秆为唯一发酵碳源时,野生型菌株D-乳酸产量为18 g/L,光学纯度为87.5%e.e,工程菌DS-L2的D-乳酸产量为21 g/L,光学纯度为99.8

关键词：德式乳杆菌保加利亚亚种 D-乳酸光学纯度基因工程生物炼制

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信任与担忧:中国共同基金执业能力评价

学习与探索 2009年第3期 140-142页

作者：丁志国王希庆吉林大学数量经济研究中心长春130012 吉林大学商学院长春130012

对共同基金的执业能力评价不仅可以帮助投资者进行科学的投资决策,同时还可以为管理层的政策制定提供理论依据。实证结果表明,中国共同基金业整体上不具备应有的执业能力;开放式基金的执业能力并没有明显优于封闭式基金;熊市中发行的共... 详细信息

对共同基金的执业能力评价不仅可以帮助投资者进行科学的投资决策,同时还可以为管理层的政策制定提供理论依据。实证结果表明,中国共同基金业整体上不具备应有的执业能力;开放式基金的执业能力并没有明显优于封闭式基金;熊市中发行的共同基金整体上执业能力强于牛市中发行的基金。因此,建议管理层在共同基金发行的速度控制上,应尽量避免在牛市中大量推出基金,而是应该在熊市中加大共同基金的发行力度,且不能简单地认为中国未来共同基金业的主流发展方向就是发展开放基金。

关键词：共同基金执业能力业绩评价

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基于音乐媒体属性的音乐媒体检索系统

图书馆建设 2006年第2期 67-69页

作者：董晓慧王希庆潍坊学院图书馆山东潍坊261061

本文旨在解决图书馆音乐媒体检索的问题。突破《中图法》不能揭示音乐作品所有检索特征的局限性,分类归纳了12种音乐媒体的属性,根据这12种音乐媒体属性创建了音乐媒体数据库和音乐媒体检索系统。特别是增加了当代音乐媒体格式的检索处... 详细信息

本文旨在解决图书馆音乐媒体检索的问题。突破《中图法》不能揭示音乐作品所有检索特征的局限性,分类归纳了12种音乐媒体的属性,根据这12种音乐媒体属性创建了音乐媒体数据库和音乐媒体检索系统。特别是增加了当代音乐媒体格式的检索处理。可分为本地检索和网络检索。

关键词：音乐媒体检索音乐媒体特征音乐媒体属性检索系统

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新时期高校工会工作的创新途径研究

马克思主义学刊 2017年第1期 61-66页

作者：王希庆北京联合大学信息学院

高校工会组织是以矢志教书育人的高校教师为主体的群众性组织,是高校教职工开展活动、丰富业余文化生活的桥梁和纽带,在维护学校发展、改革和稳定的大局中扮演着重要的角色。本文以习近平在党的群团工作会议上的讲话为指导,结合高校工... 详细信息

高校工会组织是以矢志教书育人的高校教师为主体的群众性组织,是高校教职工开展活动、丰富业余文化生活的桥梁和纽带,在维护学校发展、改革和稳定的大局中扮演着重要的角色。本文以习近平在党的群团工作会议上的讲话为指导,结合高校工会工作实际,对实现工会工作理论创新途径、体制创新途径和工作方法创新途径进行研究和思考,以推进高校工会工作上新台阶。

关键词：新时期高校工会创新途径

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莲的营养体形态及芽的结构的初步研究

Journal of Integrative Plant Biology 1956年第4期 425-438页

作者：王希庆北京农业大学农学系

本文研究内容着重在以下两方面:Ⅰ.莲的营养体各阶段的形态莲的种苗是直立的,作"之"字状曲折,具有短的节间和互生的浮叶,主根不发育而在各节上生有不定根。当种苗转入幼苗阶段,它的显著变化是节间突然的迅速伸长,表现了一个飞跃的现象,... 详细信息

本文研究内容着重在以下两方面:Ⅰ.莲的营养体各阶段的形态莲的种苗是直立的,作"之"字状曲折,具有短的节间和互生的浮叶,主根不发育而在各节上生有不定根。当种苗转入幼苗阶段,它的显著变化是节间突然的迅速伸长,表现了一个飞跃的现象,使得直立的种苗发展为横卧的幼苗,而叶(营养叶)从每个节上的背面同向排列的生长,除前一二个节上的叶为浮叶外,其余均为立叶,这时各节上也就生出较长较多的不定根。地下茎至天气渐冷时,其最后的二三个节间则变粗变短形成为藕,至来春,则在节上生出不定根,更新芽继续发展乃棘入年苗阶段。年苗与幼苗是十分相似的,至于它们的不相同处,则除体形增大增壮外,还有有性生殖器官——花的形成,所以在幼苗上仅具有营养芽而年苗上则多为混合芽。年苗的地下茎是一节接一节联合而成的,因此在一个生长季中地下茎可以产生很多地下茎节(Rhizome unit),这徉莲的营养体就显示出一个庞大的枝叶系统,一般的情形,全株长达10米左右。莲的地下茎的节间的长度与叶面积的大小,同呈单顶曲线的发展,表现着紧密的一致性与相关性,而节间的粗度则不仅与叶的面积有着连系,而且与花的发育之间也表现着不可分割的关系,这里乃接触到植物的营养繁殖与有性生殖之间的一些问题,将可能进一步为掌握藕的形成问题的研究上寻觅出方向。Ⅱ.芽的结构莲芽的结构是非常复杂而特殊的,根据芽的解剖和观察,还需耍通过一系列问题的研究,才能获得解答,本文这里仅根据莲的异乎常情的地方,总结出以下几点来: 1.莲芽的鳞片是十分发达的,不仅是在芽外被有鳞片,而且营养叶外也被有着它,不仅营养芽和混合芽外有着它,就是胚茅上的顶芽外面也是有的。 2.营养叶与包围在它外面的鳞片两者是同向排列的,那就是说鳞片重叠在营养叶的外面,并且在鳞片内看不到有茎尖的结构,因此这里也不能说是一个叶芽的结构。3.通过各级各类型的鳞片的重叠包裹,也就表现为前一极的芽套着下一极的芽的成套的现象。4.在营养叶的背面生有花或花原基的情况,这蔺直是十分新奇而费解的。

关键词：营养体营养芽混合芽种苗初步研究叶芽营养叶节简

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漫谈歌剧

黄河之声（科教创新版） 2009年第9期 104-105页

作者：王希庆曲阜师范大学日照校区音乐学院

音乐理论作曲家姆尼兹·豪普德曼在他的名作《和声与节拍的本性》里说＂音乐是流动的建筑＂,道出了艺术家对音乐艺术与建筑艺术的理解。

关键词：歌剧建筑艺术音乐理论音乐艺术作曲家艺术家和声

基于熵权的密切值法在大连市地下水水质评价中的应用

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安全与环境学报 2011年第2期11卷 113-115页

作者：郑德凤李晓研王希庆辽宁师范大学自然地理与空间信息科学辽宁省重点实验室辽宁大连116029 辽宁水文地质工程地质勘察院辽宁大连116037

密切值法作为一种多目标的决策方法适用于多测点、多指标的水环境质量评价系统。在分析密切值法的原理、方法与步骤的基础上,引入熵权法确定各评价指标的权重,运用改进密切值法对大连市地下水水质进行综合评价。研究表明,基于熵权的改... 详细信息

密切值法作为一种多目标的决策方法适用于多测点、多指标的水环境质量评价系统。在分析密切值法的原理、方法与步骤的基础上,引入熵权法确定各评价指标的权重,运用改进密切值法对大连市地下水水质进行综合评价。研究表明,基于熵权的改进密切值法的评价结果具有直接、客观,各个样本间差异性大,结果对比更明显等特点,能直观地体现大连市区的地下水水质状况。在评价过程中还可得出大连市区地下水质的主要超标项目,可以有针对性地进行污染的控制与治理。

关键词：环境工程学地下水水质评价密切值熵权