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HIV-1 C亚型密码子优化gp120负载人DC疫苗的构建及体外功能

Construction and function research of dendritic cell vaccine loaded with Codon usage-optimized gp120 of HIV-1 subtype C in vitro

作     者:白雪 夏厚军 戴正喜 马建平 李少遊 郑永唐 

作者机构:中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室650223 中国科学院研究生院100049 

出 版 物:《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期:2010年第26卷第9期

页      面:741-746页

核心收录:

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金(30471605) 中国科学院知识创新工程重要方向(KSCX1-YW-R-15,KSCX2-YW-R-092) 云南省科技基础条件平台计划(2006PT08) 

主  题:HIV-1 C亚型 密码子优化 gp120 树突状细胞 

摘      要:目的构建HIV-1C亚型gp120负载人树突状细胞(dentriti ccell,DC)疫苗,并对其体外功能进行初步检测。方法利用Amaxa细胞核转染技术将pcDNA3.1-gp120质粒转染至人成熟DC,以Western blot检测gp120的表达。通过流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的变化、混合淋巴细胞反应、CD8+T细胞表面活化分子CD25的表达及其分泌IFN-γ的变化。结果通过Western blot检测,gp120在DC中得到了正确表达。经流式细胞仪检测,DC表面分子CD80表达率由刺激前的33.34%上升至43.20%,CD86表达率由刺激前的60.08%上升至90.34%;负载gp120DC刺激淋巴细胞增殖率为86.72%;CD8+T细胞表面分子CD25表达率由刺激前的5.27%上升至74.21%,IFN-γ的表达率达37%。结论负载了HIV-1gp120的人树突状细胞能够显著刺激淋巴细胞的增殖、增强CD8+T细胞表面活化分子CD25表达以及促进CD8+T细胞分泌IFN-γ,为下一步DC治疗性疫苗的体内研究奠定基础。

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