坏死性凋亡和p38MAPK通路的相互作用介导高糖引起的H9c2心肌细胞损伤

作     者：梁伟杰 何洁仪 陈君 余盛龙 张稳柱 宋明才 陈景福 冯鉴强 廖新学 LIANG Wei-jie;HE Jie-yi;CHEN Jun;YU Sheng-long;ZHANG Wen-zhu;SONG Ming-cai;CHEN Jing-fu;FENG Jian-qiang;LIAO Xin-xue

作者机构：广州市番禺区中心医院心血管内科 广州市番禺区心血管疾病研究所广东广州511400 中山大学附属第一医院黄埔院区心血管内科CCU广东广州510700 中山大学附属第一医院心血管内科广东广州510080 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2016年第32卷第8期

页      面：1138-1144页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No 81270296) 广东省财政科技项目(No 2014SC107) 

主　　题：坏死性凋亡 p38丝裂原激活蛋白激酶 相互作用 高糖 心肌细胞 损伤 

摘      要：目的研究坏死性凋亡(necroptosis,Nec)和p38丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路的相互作用在高糖引起H9c2心肌细胞损伤中的作用。方法应用细胞计数盒检测心肌细胞存活率;双氯荧光素染色荧光显微镜照相法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;罗丹明123染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);蛋白质免疫印迹法测定RIP3蛋白(反映Nec的指标)和p38MAPK蛋白的表达水平。结果高糖(35 mmol·L^(-1)葡萄糖,HG)作用H9c2心肌细胞24 h可引起明显的细胞损伤,表现为细胞存活率降低,ROS生成及MMP丢失增多;应用100μmol·L^(-1)necrostatin-1(Nec-1,Nec特异性抑制剂)和HG共处理心肌细胞24 h或3μmol·L^(-1)SB203580(p38MAPK抑制剂)预处理心肌细胞60 min,再予HG作用24 h可减轻高糖引起的上述损伤。此外,HG作用心肌细胞1、3、6、9、12、24、36和48 h均能明显增加RIP3蛋白的表达水平,其中24 h时表达水平增加最明显。应用100μmol·L^(-1)Nec-1共处理或3μmol·L^(-1)SB203580预处理心肌细胞均能明显地抑制HG对RIP3蛋白表达的上调作用。另一方面,应用100μmol·L^(-1)Nec-1共处理心肌细胞能阻断HG对磷酸化(p)-p38MAPK表达的上调作用。结论 Nec和p38 MAPK通路的相互作用介导高糖引起H9c2心肌细胞损伤。