噬菌体抗体库固相筛选条件的初步研究

作     者：王明桥 罗文新 陈瑛炜 袁权 王晋 张军 夏宁邵 WANG Ming-qiao;LUO Wen-xin;CHEN Ying-wei;YUAN Quan;WANG Jin;ZHANG Jun;XIA Ning-shao

作者机构：福建省医学分子病毒学研究中心厦门大学教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室福建厦门361005 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2006年第22卷第5期

页      面：664-667页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：福建省科技重大项目(2002F013) 国家"十五"创新药物博士基金(2003AA2Z3539) 福建省自然科学基金(C0310005) 

主　　题：噬菌体抗体库 固相筛选 筛选条件 

摘      要：目的:探讨噬菌体抗体库的固相筛选条件,为筛选方案的设计提供实验依据。方法:利用多种针对HEVNE2蛋白的特异性噬菌体人源抗体和非特异性噬菌体人源抗体,对噬菌体抗体与抗原的结合时间、抗原包被的浓度、洗涤强度和洗脱方式等多种筛选的条件进行初步探索。结果:阳性噬菌体抗体与抗原反应1min,就可较好结合,洗涤次数为20～30次、洗涤液的pH为5时,筛选得到的阳性率最高。包被抗原的浓度对筛选的阳性率没有明显影响,用10mg/L抗原竞争洗脱60min,可得到较高的阳性率。结论:噬菌体抗体库的筛选是一个非常复杂的过程,其中的各个条件之间有着密切的联系,应该根据具体情况进行调整。