鼠伤寒沙门菌spvB基因缺陷突变株的构建

作     者：邱桥成 叶颖 储元元 廖莉 吴淑燕 黄瑞 Qiu Qiaocheng;Ye Ying;Chu Yuanyuan;Liao Li;Wu Shuyan;Huang Rui

作者机构：苏州大学医学部病原生物学系苏州215123 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所苏州215006 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2012年第28卷第12期

页      面：180-183页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30972768) 江苏省自然科学基金资助项目(L2134051511) 江苏省青蓝工程(SR13400211) 高等学校博士学科点专项科研基金项目(20103201110009) 

主　　题：鼠伤寒沙门菌 spvB毒力基因 同源重组 基因敲除 自杀质粒 

摘      要：高度保守的spvB基因,其编码产物具有ADP核糖基转移酶活性,是导致受染后细胞发生凋亡的重要毒力因子。为进一步研究该基因致病机制,构建了鼠伤寒沙门菌spvB基因缺陷突变株。根据GenBank鼠伤寒沙门菌spvB基因序列,用PrimerPremier 5.0设计PCR特异性引物,获得spvB基因缺陷性核苷酸片段后连接至自杀质粒PGMB151。将构建的自杀载体导入含有spvB基因的鼠伤寒沙门菌标准株SR-11中进行同源重组,PCR筛选缺陷突变株。经PCR和DNA序列测定,成功获得了spvB基因缺陷的鼠伤寒沙门菌突变株。