稳定表达TSC1/TSC2蛋白质复合物的293T细胞系的建立

作     者：闫丽君 吴更 

作者机构：上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200240 

出 版 物：《中国细胞生物学学报》 (Chinese Journal of Cell Biology)

年 卷 期：2012年第34卷第12期

页      面：1215-1219页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30821005)资助项目~~ 

主　　题：TSC1 TSC2 稳转细胞系 真核细胞双元表达载体 Zeocin 

摘      要：我们使用Clonetech的同源重组酶连接人TSC1、TSC2全长蛋白编码cDNA ORF到pBudCE4.1真核细胞双元表达载体上,用脂质体Lipofectamine 2000介导重组质粒pBudCE4.1/TSC2/TSC1导入293T细胞,用含125μg/mL Zeocin的培养基筛选稳定表达TSC1/TSC2蛋白的细胞株,并用Western blot方法鉴定稳转细胞株的稳定性。该实验成功建立了稳定表达TSC1/TSC2蛋白的293T细胞系,从而为今后研究TSC1/TSC2蛋白的结构与功能提供实验基础。