稳定表达TSC1/TSC2蛋白质复合物的293T细胞系的建立
Generation of Stable Production of TSC1/TSC2 Protein Complex from 293T Cell Line作者机构:上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200240
出 版 物:《中国细胞生物学学报》 (Chinese Journal of Cell Biology)
年 卷 期:2012年第34卷第12期
页 面:1215-1219页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金:国家自然科学基金(No.30821005)资助项目~~
主 题:TSC1 TSC2 稳转细胞系 真核细胞双元表达载体 Zeocin
摘 要:我们使用Clonetech的同源重组酶连接人TSC1、TSC2全长蛋白编码cDNA ORF到pBudCE4.1真核细胞双元表达载体上,用脂质体Lipofectamine 2000介导重组质粒pBudCE4.1/TSC2/TSC1导入293T细胞,用含125μg/mL Zeocin的培养基筛选稳定表达TSC1/TSC2蛋白的细胞株,并用Western blot方法鉴定稳转细胞株的稳定性。该实验成功建立了稳定表达TSC1/TSC2蛋白的293T细胞系,从而为今后研究TSC1/TSC2蛋白的结构与功能提供实验基础。