巢式PCR方法在快速检测新生儿败血症病原菌中的应用

作     者：丁红辉 裴磊 朱沅珍 孔莹莹 陈肖燕 DING Hong-hui;PEI Lei;ZHU Yuan-zhen;KONG Ying-ying;CHEN Xiao-yan

作者机构：义乌市妇幼保健院浙江义乌322000 浙江大学医学院附属邵逸夫医院浙江杭州310000 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2016年第26卷第2期

页      面：204-205,210页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：浙江省医药卫生科技计划(2013KYA216) 

主　　题：巢式聚合酶链反应 16S rRNA基因 新生儿败血症 

摘      要：目的探讨巢式聚合酶链反应(PCR)方法在快速检测新生儿败血症病原菌中的应用价值。方法以细菌16S rRNA基因为扩增靶序列,设计一对所有细菌通用引物和一对革兰阴性菌特有引物,用巢式PCR方法扩增已知病原菌,检测其特异性。用巢式PCR方法和培养法同时检测新生儿败血症血液,对2种方法的检测结果进行比较分析。结果已知实验菌株经通用引物扩增后均获得920 bp产物,革兰阴性菌经革兰阴性菌特有引物扩增后获得353 bp产物,而革兰阳性菌、人类基因组DNA、巨细胞病毒和白色假丝酵母菌无相对应产物。2种方法检测病原菌革兰分型吻合度一致,但巢式PCR方法阳性率高。结论巢式PCR方法检测新生儿败血症病原菌,具有快速、敏感度高等优点,并能对病原菌进行革兰分型,具有一定的实用价值。