TAIL-PCR方法快速分离Xcc致病相关基因序列

作     者：应革 武威 何朝族 YING Ge\ WU Wei\ HE Chao Zu * (Institute of Microbiology,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100080,China)

作者机构：中国科学院微生物研究所北京100080 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2002年第18卷第2期

页      面：182-186页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：中国科学院创新方向基金资助 (No .KXCX2 1 0 2 0 1)~~ 

主　　题：Xcc 致病相关基因 mini-Tn5 gfp-km转座子 TAIL-PCR 分离 野油菜黄单胞菌 

摘      要：以mini Tn5gfp km转座子中nptII片段作为探针 ,对已获得的五株野油菜黄单胞菌野油菜黑腐病致病型(Xcc)非致病突变体进行了Southernblot分析 ,结果表明 ,这五株突变体确由mini Tn5gfp km转座子插入致病相关基因所致 ,且为单拷贝不同位点的插入。提取这五株突变体总DNA作为模板 ,采用改进的热不对称交错PCR (TAIL PCR)方法从其中克隆到了各自转座子插入区侧翼序列 ,对这些侧翼序列进行了序列测定并将分析结果与GenBankdatabase及Xcc全基因组序列做了比较 ,结果表明 ,五个侧翼序列所在的基因确与Xcc致病性有关。这种改进后的TAIL