三七总皂苷抑制JNK/c-Jun信号通路干预钙化性主动脉瓣疾病的效应及机制研究

作     者：李洪峥 刘天娇 商祖诚 栗梦凡 林国晟 张斌 于子凯 付长庚 吴永健 陈可冀 LI Hongzheng;LIU Tianjiao;SHANG Zucheng;LI Mengfan;LIN Guosheng;ZHANG Bin;YU Zikai;FU Changgeng;WU Yongjian;CHEN Keji

作者机构：中国中医科学院西苑医院国家中医心血管病临床医学研究中心北京100091 中国中医科学院广安门医院博士后流动站 福建中医药大学中西医结合学院 中国医学科学院阜外医院冠心病中心 

出 版 物：《北京中医药大学学报》 (Journal of Beijing University of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2024年第47卷第11期

页      面：1550-1561页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金青年基金项目(No.82104679) 中国中医科学院基本科研业务费优秀青年科技人才培养专项(No.ZZ15-YQ-004) 中国中医科学院西苑医院能力提升项目(No.XYZX0101-37,No.YJMPSC202422) 

主　　题：三七总皂苷 细胞凋亡 c-Jun氨基端激酶/c-Jun信号通路 主动脉瓣 钙化性主动脉瓣疾病 小鼠 

摘      要：目的探讨三七总皂苷调控c-Jun氨基端激酶(JNK)/c-Jun信号通路改善小鼠钙化性主动脉瓣疾病的作用与机制。方法将21只6~8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠,按随机数字表法分为模型组、三七总皂苷高剂量组(60 mg/kg)、三七总皂苷低剂量组(30 mg/kg),每组7只;另设9只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠为对照组。予对照组小鼠普通饲料饲养,予ApoE^(-/-)小鼠高脂饲料饲养12周。12周后,随机选取ApoE^(-/-)小鼠每组各1只和C57BL/6小鼠3只,评估造模效果。确认造模成功后,予三七总皂苷高、低剂量组小鼠每日灌胃相应药物,对照组、模型组小鼠灌胃等体积生理盐水,连续4周。治疗结束后,超声检测各组小鼠瓣环直径、峰值流速;硝酸银(von Kossa)染色、茜素红S染色评估主动脉瓣钙化程度;生化法检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;酶联免疫吸附试验检测血清白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)含量;免疫组织化学法检测钙化标志物Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨形态发生蛋白2(BMP2)阳性染色率;TUNEL染色评估主动脉瓣细胞凋亡情况;实时荧光PCR、免疫荧光检测JNK/c-Jun信号通路相关指标mRNA表达和平均荧光强度。结果与对照组比较,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-1β升高,IL-4、IL-10降低,瓣环直径减小,峰值流速升高,von Kossa、茜素红S染色阳性面积占比增多,主动脉瓣细胞凋亡率升高,BMP2、RUNX2阳性染色率增加,JNK与c-Jun mRNA表达水平、p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun均升高(均P0.05)。与模型组比较,三七总皂苷低剂量组小鼠血清TC、LDL-C、TNF-α降低,瓣环直径增大,峰值流速降低,茜素红S染色阳性面积减少,BMP2、RUNX2阳性染色率、JNK和c-Jun mRNA表达水平、p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun均降低(均P0.05);三七总皂苷高剂量组血清HDL-C、IL-4、IL-10升高,TC、LDL-C、TNF-α、IL-1β降低,瓣环直径增大,峰值流速降低,von Kossa与茜素红S染色阳性面积占比减少、细胞凋亡染色率降低,BMP2与RUNX2阳性染色率降低,JNK、c-Jun mRNA表达水平及p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun均降低(均P0.05)。结论三七总皂苷可通过抑制JNK/c-Jun信号通路,减少瓣膜细胞凋亡,降低炎症水平,减轻小鼠主动脉瓣钙化程度。