人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库的构建

作     者：王彦刚 章翔 阎岩 付洛安 刘卫平 吴景文 郭庆东 刘先珍 

作者机构：第四军医大学西京医院 第四军医大学微生物教研室 

出 版 物：《解放军医学杂志》 (Medical Journal of Chinese People's Liberation Army)

年 卷 期：2001年第26卷第11期

页      面：795-797页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助课题 (编号 39970 85 2 ) 

主　　题：神经胶质瘤 噬菌体抗体库 单链抗体 免疫治疗 脑肿瘤 PBL 外周血淋巴细胞 

摘      要：为构建人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库 ,从脑胶质瘤患者外周血淋巴细胞 (PBL)中提取细胞总RNA ,经逆转录后用套式PCR分别扩增抗体轻链Vκ和重链VH基因。先构建Vκ基因库 ,并使连接Vκ和VH基因的linker与Vκ基因连接 ,再将VH基因克隆入Vκ基因库 ,即构建成功单链抗体 (ScFv)库。随机挑取菌落鉴定 ,测序表明从PBL中扩增出人源性Vκ和VH基因 ,并构建了库容量约为 2× 10 6的ScFv噬菌体抗体库。随机挑取克隆的测序表明 ,测定的VH基因与Kabat的抗体基因库中人抗体VH基因有较高的同源性 ,证明所克隆的基因属人抗体可变区基因。结果表明实验构建成人源性脑胶质瘤噬菌体抗体库 。