RAD54L 在口腔鳞状细胞癌中的表达及功能研究

作     者：曹显 陈佳琳 张锐 过新民 CAO Xian;CHEN Jialin;ZHANG Rui;GUO Xinmin

作者机构：暨南大学附属广州红十字会医院口腔科广东广州510220 暨南大学附属广州红十字会医院超声医学科广东广州510220 暨南大学附属广州红十字会医院急诊医学科广东广州510220 

出 版 物：《口腔疾病防治》 (Journal of Prevention and Treatment for Stomatological Diseases)

年 卷 期：2024年第32卷第11期

页      面：853-862页

学科分类：1003[医学-口腔医学] 10[医学] 

基　　金：广东省自然科学基金项目(2020A1515010816) 广州市市校(院)企联合资助基础与应用基础研究项目(2024A03J0676) 

主　　题：同源重组修复基因 RAD54L 口腔鳞状细胞癌 预后 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期 生物信息学分析 

摘      要：目的探讨DNA修复重组RAD54样蛋白(RAD54-like protein,RAD54L)在口腔鳞状细胞癌(oral squa-mous cell carcinoma,OSCC)中的表达及功能作用。方法利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TC-GA)数据库中OSCC相关数据,通过Mann-Whitney U检验分析RAD54L在OSCC与对照样本中的表达差异,并采用受试者工作特征曲线评估RAD54L在OSCC诊断中的潜在价值。通过卡方检验分析RAD54L mRNA表达水平与OSCC患者临床病理数据之间的关系。将OSCC样本根据RAD54L mRNA表达中位值分为高低表达两组后,采用Cox回归分析比较两组的预后差异;采用DESeq2软件包筛选组间的差异表达基因,并利用cluster-Profiler包进行KEGG通路富集分析。采用Spearman相关性分析展示RAD54L与同源重组修复途径中基因表达的相关性。在明确RAD54L的生物信息学意义后,在人OSCC细胞株HSC-3中进行RAD54L基因敲低实验,并通过qRT-PCR验证敲低效率。转染后,通过CCK-8、5-乙炔基-2 -脱氧尿苷(5-ethynyl-2 -deoxyuridine,EdU)染色、细胞划痕、细胞凋亡及细胞周期实验,评估HSC-3细胞增殖、迁移、凋亡及周期的变化。结果生物信息学分析结果显示,RAD54L mRNA在OSCC中的表达高于正常对照组(P0.8,P0.05)。体外实验结果表明,RAD54L在HSC-3细胞中的表达被敲低至约25%(P0.001),与对照组相比,RAD54L敲低组的增殖率降低(P0.05),EdU阳性细胞比例下降(P0.001),划痕闭合比例降低(P0.001),G1期细胞比例增加(P0.001),S期细胞比例降低(P0.001),细胞凋亡比例增加(P0.001)。结论RAD54L在OSCC中高表达且与不良预后相关。下调RAD54L表达可抑制HSC-3细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡,并阻碍细胞周期进程。