应用大鼠血清建立体外软骨细胞退变模型

作     者：王小军 张浩 詹红生 丁道芳 WANG Xiao-jun;ZHANG Hao;ZHAN Hong-sheng;DING Dao-fang

作者机构：浙江中医药大学附属湖州市中医院骨科浙江湖州313000 上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海201203 

出 版 物：《浙江大学学报（医学版）》 (Journal of Zhejiang University(Medical Sciences))

年 卷 期：2015年第44卷第3期

页      面：308-314页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81073114) 上海市高校青年教师培养资助计划(ZZszy12017) 

主　　题：白细胞介素1β 软骨细胞 大鼠 Wistar 血清 细胞增殖 软骨疾病 细胞 培养的 

摘      要：目的：应用大鼠血清建立大鼠体外软骨细胞退变模型。方法：取出生24 h SD大鼠关节处软骨，Ⅱ型胶原酶多次消化后获得原代软骨细胞，取原代细胞进行实验。软骨细胞分别用含10％胎牛血清的DMEM （对照组）、含50 ng／mL 白细胞介素（ IL ）－1β＋10％胎牛血清的 DMEM （ IL－1β组）、含2．5％大鼠血清的DMEM（2．5％血清组）及含5．0％大鼠血清的DMEM（5．0％血清组）中培养。培养24 h后，观察细胞形态变化，MTT法检测各组细胞的增殖情况，蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原的表达和Ⅱ型胶原及MMP－13的表达，实时定量PCR检测退变相关基因ADAMTS5、MMP－9、Aggrecan和SOX－9的表达。结果：两血清组和IL－1β组的软骨形态均由原来的多角形变成长梭形，且两血清组和IL－1β组均促进软骨细胞的增殖，下调转录因子SOX－9和上调基质降解酶MMP－13、MMP－9、ADAMTS5的表达。结论：大鼠血清具有促进软骨退变的作用，可用于建立体外软骨退变模型。