大鼠全长OBRbcDNA克隆及真核表达重组体的构建

作     者：王佑民 黎峰 程桦 傅祖植 

作者机构：安徽医科大学第一附属医院内分泌科合肥230022 中山医科大学孙逸仙纪念医院内分泌科广州510120 

出 版 物：《安徽医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Anhui)

年 卷 期：2002年第37卷第5期

页      面：333-335页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：广东省自然科学基金 (编号 :980 117) 卫生部基金 (标号 :98-1-0 91)资助课题 

主　　题：真核表达重组体 瘦素受体 基因克隆 质粒 瘦素 

摘      要：目的 克隆SD大鼠全长长胞内段瘦素受体基因cD NA(OBRbcDNA)及构建其真核表达重组体 ,为进一步研究该基因打下基础。方法 应用RT PCR方法分段扩增全长OBRbcDNA ,再将它们连接起来 ,并获得载有全长OBRbcDNA的阳性克隆质粒。将上述质粒中全长OBRbcDNA定向插入真核表达质粒pcDNA3中 ,筛选出阳性克隆。通过限制性内切酶酶切和核苷酸序列测定进行鉴定。结果 重组的克隆质粒和真核表达质粒经限制性内切酶酶切后获得的片段大小均与理论值一致。结论 成功地克隆了SD大鼠全长OBRbcDNA 。