克隆化反向杂交探针的制备

作     者：李卫国 栾旭东 黄涛 朱宁宁 秦学斌 黄尚志 龙桂芳 沈岩 吴冠芸 Li Weiguo;Luan Xudong;Huang Tao;Zhu Ningning;Qin Xuebin;Huang Shangzhi;Long Guifang),Shen Yan;Wu Guanyun(Institute of Basic Medical Sciences, CAMS/PUMC, Beijing 100005,China) GUangxiMedical college, Nanning 530027, China).

作者机构：中国医学科学院基础医学研究所 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：1996年第23卷第3期

页      面：273-278页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家863计划 国外基金 

主　　题：反向杂交 探针 制备 克隆 β-地中海贫血 

摘      要：反向斑点杂交是将寡核苷酸探针固定在膜上，用标记的靶序列与固定在膜上的探针进行杂交．与正向杂交相比，它通过一次杂交即可确定多种基因型，是一种快速筛查ＤＮＡ点突变的诊断方法我们选择β－地中海贫血基因－２８（Ａ→Ｇ）、ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）、ＣＤ４１～４２（－ＴＴＣＴ）三种点突变为模型采用ＰＣＲ扩增产生串联多拷贝序列探针并将其克隆化．将克隆化探针固定于尼龙膜上，与同位素标记的β－珠蛋白基因ＰＣＲ片段进行杂交，检测β－地贫患者的基因型．