未知基因KH开放阅读框架真核表达载体的构建及其对K562细胞增殖的影响

作     者：何於娟 张彦 刘小珊 马凌娣 欧一衡 蒋纪恺 

作者机构：重庆医科大学基础医学院临床生化教研室重庆400016 重庆医科大学临床学院血液科重庆400016 重庆市永川市人民医院重庆永川402160 

出 版 物：《重庆医科大学学报》 (Journal of Chongqing Medical University)

年 卷 期：2004年第29卷第5期

页      面：559-562页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：国家自然科学基金项目 (No:3 9670 881 3 0 17115 0 ) 

主　　题：KH基因 开放阅读框架 真核表达 K562细胞 增殖 

摘      要：目的 :构建未知基因KH的开放阅读框架 (openreadingframe,ORF)的真核表达体系 ,初步探讨未知基因KH的功能。方法 :采用DNA重组技术将KH基因片段的开放阅读框架 (KH -ORF)亚克隆于表达载体 pCl-neoMammalianExpres sionVector,重组为pCI-neo -KH -ORF真核表达体系 ,脂质体转染K5 6 2细胞 ,RT -PCR检测目的基因KH的表达。采用体外培养技术 ,通过 pCI -neo -KH -ORF质粒转染K5 6 2细胞前后的生长曲线和乳酸脱氢酶活性测定观察KH -ORF对K5 6 2细胞增殖速度的影响。结果 :KH -ORF在K5 6 2细胞中获得表达 ,对细胞增殖速度有明显影响。结论 :KH -ORF表达产物可能是一个与K5 6 2细胞增殖有关的功能蛋白质 。