HNE诱导下PKCδ/θ-Duox1-ROS对气道黏液高分泌影响的体外实验研究

作     者：何明欣 杨雅楼 徐立 杨雨菡 张紫薇 周向东 李琪 HE Mingxin;YANG Yalou;XU Li;YANG Yuhan;ZHANG Ziwei;ZHOU Xiangdong;LI Qi

作者机构：北京大学深圳医院重症医学科 海南省呼吸疾病中心 海南医科大学第一附属医院呼吸内科 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2024年第40卷第10期

页      面：2042-2045+2051页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(82160012,82260001) 国家卫生健康委员会热带病防治重点实验室开放课题(2021NHCTDCKFKT21008) 海南省重点研发项目(ZDYF2020223) 海南省重大科技专项(ZDKJ2021036) 海南省创新团队项目(820CXTD448) 海南省重点研发计划国际科技合作项目(GHYF2022011) 海南省临床医学中心建设项目 

主　　题：蛋白激酶Cδ/θ 双重功能氧化酶1 活性氧 黏蛋白5AC 

摘      要：目的：探讨蛋白激酶C(PKC)δ/θ-双重功能氧化酶1(Duox1)-活性氧（ROS）信号通路对人气道黏蛋白（MUC）5AC的调控作用及机制，为气道黏液高分泌治疗提供新靶点。方法：PKC及其亚基PKCδ/θ抑制剂、Duox1抑制剂或自由基清除剂DMTU预处理人气道上皮细胞16HBE，给予人中性粒细胞弹性蛋白酶（HNE）刺激建立体外气道炎症细胞模型。试剂盒测定各组细胞ROS生成水平，实时荧光定量PCR检测Duox1和MUC5AC mRNA水平，Western blot测定各组细胞干扰因素对Duox1蛋白水平的影响，ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白表达。结果：与对照组相比，HNE组ROS生成明显增多，Duox1、MUC5AC mRNA和蛋白表达增加（P0.05）。结论：体外细胞模型实验中，HNE可通过PKCδ/θ-Duox1-ROS介导MUC5AC高表达，在气道黏液高分泌发展过程中起重要作用。