低温脂肪酶产生菌的筛选、表达及酶学性质分析

作     者：许琳琳 刘慧乾 张梦瑶 张慧静 李家兴 戚晨晨 王成涛 XU Linlin;LIU Huiqian;ZHANG Mengyao;ZHANG Huijing;LI Jiaxing;QI Chenchen;WANG Chengtao

作者机构：老年营养与健康教育部重点实验室(北京工商大学)北京市食品添加剂工程技术研究中心(北京工商大学)北京100048 新疆新康农业发展有限公司新疆乌鲁木齐830032 

出 版 物：《食品工业科技》 (Science and Technology of Food Industry)

年 卷 期：2024年第45卷第20期

页      面：133-140页

核心收录：

学科分类：08[工学] 082203[工学-发酵工程] 0822[工学-轻工技术与工程] 

基　　金：新疆“两区”科技发展计划项目(2022LQ02003) “天池人才”特聘专家项目 老年营养与健康教育部重点实验室(北京工商大学)(19008023032) 北京工商大学食品科学与工程“双一流”学科建设培育项目(BTBUYXTD202208) 

主　　题：低温脂肪酶 苏云金芽孢杆菌 基因克隆 异源表达 酶学性质 

摘      要：为筛选高产低温脂肪酶的菌株,并为脂肪酶的工业化开发提供生产资料。利用罗丹明B培养法从漠河县兴安落叶松林为主的林下土壤中分离出1株低温脂肪酶产生菌,对其形态学、生理生化特性进行鉴定,并结合16S rDNA基因序列,确定该菌株为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。以苏云金芽孢杆菌基因组为模板克隆脂肪酶基因Lip240,对Lip240进行异源表达以及酶学性质的分析。结果表明:该重组脂肪酶Lip240的最适反应温度为30℃,在4~30℃条件下处理6 h能维持60%以上的活性,是一种低温脂肪酶,最适pH为8.0。Ca^(2+)、Mn^(2+)、Fe^(2+)、Fe^(3+)和Cr^(3+)对脂肪酶Lip240的酶活有一定的促进作用。该酶具有较好的有机溶剂耐受性,SDS能够显著(P0.05)抑制脂肪酶Lip240的酶活。该酶更偏好于水解中短链底物。该结论可为微生物资源开发利用和低温脂肪酶的工业应用提供一定的理论依据。