阿魏酸酯酶O42807在毕赤酵母GS115中的表达
Expression of Feruloyl Esterase O42807 in Pichia pastoris GS115作者机构:华侨大学化工学院福建厦门361021
出 版 物:《华侨大学学报(自然科学版)》 (Journal of Huaqiao University(Natural Science))
年 卷 期:2016年第37卷第2期
页 面:224-229页
学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金:福建省厦门市科技计划项目(2014S006) 福建省发改委投资基金资助项目(2013-886)
摘 要:研究阿魏酸酯酶O42807基因(fae)在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达及重组阿魏酸酯酶的酶学特性.化学合成fae基因序列,构建分泌型重组质粒pPIC9K-fae,经线性化后电转化至毕赤酵母GS115,对筛选出的高活性转化子进行诱导表达.SDS-PAGE分析显示:发酵上清液为单一条带,表观相对分子质量为42ku,酶活为78.49nkat·mL-1,比活力为524.38nkat·mg-1,最适反应温度为50℃,在40~45℃温度范围内较稳定,最适反应pH值为5.0~5.5,且在pH值为6.0时,稳定性较好;金属离子K+,Ca^(2+),Na+对其活性有促进作用,Fe^(2+),Zn^(2+)有一定的抑制作用,而Mn^(2+),Cu^(2+)对其有明显的抑制作用.