人源性同种异体去细胞外周神经材料标准制备方法的研究

作     者：易建华 刘小林 朱家恺 朱庆棠 李智勇 胡军 向剑平 江丽 何彩凤 YI Jian-hua;LIU Xiao-lin;ZHU Jia-kai;ZHU Qing-tang;LI Zhi-yong;HU Jun;XIANG Jian-ping;JIANG Li;HE Cai-feng

作者机构：中山大学附属一院黄埔院区上肢骨科广州510080 黄埔院区骨研所 中山大学附属第一医院显微外科 

出 版 物：《中华显微外科杂志》 (Chinese Journal of Microsurgery)

年 卷 期：2009年第32卷第3期

页      面：207-209,I0005页

核心收录：

学科分类：08[工学] 080501[工学-材料物理与化学] 0805[工学-材料科学与工程（可授工学、理学学位）] 080502[工学-材料学] 

基　　金：国家科学技术部“863”科技攻关项目(2006AA02A130) 广州市科技攻关重大项目(2005Z1-E0091) 省部产学研合作专项资金项目(2007B090400090) 广东省卫生医学科研基金(A2008161) 

主　　题：外周神经 神经支架 化学萃取 

摘      要：目的对目前文献报道使用的5种不同方法制备的人源性同种异体去细胞外周神经材料进行综合分析比较其优劣，以确定可供临床使用的标准的制备流程。方法将人源性神经按5种不同方法进行化学萃取，制备的外周神经支架材料分别行苏木精-伊红（HE）染色、免疫组化（S-100、ColⅠ）和透射电镜、氮含量测定等检测，观察5种方法去除许旺细胞、髓鞘和轴突等抗原成分以及基底膜保存完好的情况。结果分别萃取2次持续24h组神经的HE染色显示去除细胞和轴突彻底，纵切片上未见任何细胞，红染的神经内膜呈波浪状纵形排列，轴突、髓鞘结构消失而形成管柱状空隙；S-100染色呈阴性；ColⅠ染色结果可以看出其结构呈松散不规则的棕黄色结构，而其它处理组则结构相对整齐的纵向带状结构。透射电镜显示该组与各处理之间髓鞘去除差异无统计学意义。氮含量测定显示该组蛋白含量比值最低。结论使用TritonX-100处理24h再分别脱氧胆酸钠24h持续萃取2次，可作为供临床使用的制备人源性去细胞同种异体神经支架材料的标准流程。