γ干扰素诱导蛋白-10的硫氧还基因融合表达、纯化及生物活性检测

作     者：李刚 田聆 魏于全 文艳君 肖飞 姚兵 张伶 张汝 梅开 Li Gang;Tian Ling;Wei Yuquan;Wen Yanjun;Xiao Fei;Yao Bing;Zhang Ling;Zhang Ru;Mei Kai

作者机构：四川大学华西医院人类疾病生物治疗重点实验室.肿瘤中心成都610041 

出 版 物：《生物医学工程学杂志》 (Journal of Biomedical Engineering)

年 卷 期：2005年第22卷第3期

页      面：535-539页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家重点基础研究发展规划(973)前期研究专项资助(2001-50) 

主　　题：γ干扰素诱导蛋白-10 硫氧还基因 基因融合 基因表达 基因纯化 生物活性 

摘      要：γ干扰素诱导蛋白-10是由γ干扰素刺激单核细胞、内皮细胞等所诱导产生趋化T淋巴细胞的一类分泌性糖蛋白。本研究PCR扩增人与鼠γ干扰素诱导蛋白-10的成熟蛋白编码区,克隆到硫氧还载体pET-32(a)进行诱导表达。SDS-PAGE分析显示:在IPTG诱导下,人与鼠的γ干扰素诱导蛋白-10表达量约占目标总蛋白的25.3%,主要以包含体的形式存在,可溶性成分约占目标总蛋白的20%。将可溶性蛋白以S-Tag亲和层析柱进行纯化,纯化的蛋白质纯度约为90%的γ干扰素诱导蛋白-10。通过趋化性分析,证实重组表达的人与鼠γ干扰素诱导蛋白-10在100ng/ml浓度下对激活的T淋巴细胞具有趋化活性。