低氧对人牙周膜干细胞骨向分化影响的实验研究

作     者：候建霞 Peter M Loomer HOU Jian-xia

作者机构：北京大学口腔医学院口腔医院牙周科北京100081 Division of PeriodontologyUniversity of California School of DentistrySan FranciscoU.S.A 

出 版 物：《中华口腔医学杂志》 (Chinese Journal of Stomatology)

年 卷 期：2009年第44卷第9期

页      面：543-547页

核心收录：

学科分类：07[理学] 08[工学] 082504[工学-人机与环境工程] 0825[工学-航空宇航科学与技术] 0713[理学-生态学] 

基　　金：国家自然科学基金(30600705) 

主　　题：骨形态发生蛋白质类 低氧 牙周膜干细胞 骨向分化 

摘      要：目的观察体外低氧培养环境对人牙周膜干细胞（human periodontal ligament stem cells，hPDLSC）生长、增殖及骨向分化的影响，以期为应用hPDLSC治疗牙周病提供依据。方法hPDLSC分别培养于常氧环境（氧的体积分数为20％）和低氧环境（氧的体积分数为1.5％-2％）中。在培养的第1，2，4，6天分别提取细胞总RNA和总蛋白。运用蛋白免疫印迹法和半定量反转录聚合酶链反应分析比较不同培养环境下hPDLSC中碱性磷酸酶、骨钙素、富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白和骨形成蛋白2的表达。结果在培养的第1、2天低氧轻度刺激hPDLSC的增殖（低氧组4值分别为0.516和0.697，常氧组A值分别为0.418和0.617），第3天后则明显抑制hPDLSC的增殖（低氧组A值0.870，常氧组4值1.242）。在培养第5天后低氧抑制碱性磷酸酶的活性高达90％（低氧组A值0.004，常氧组A值0.049）。低氧抑制富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白在蛋白水平的表达，也抑制碱性磷酸酶、骨钙素和骨形成蛋白2在mRNA水平的表达。结论低氧抑制hPDLSC的增殖并下调骨形成蛋白2的表达，继而下调其下游目的基因，如碱性磷酸酶、骨钙素和富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白的表达，从而抑制了人牙周膜干细胞骨向分化。