检索结果-南通市图书馆

低氧促进脂多糖诱导小胶质细胞CXCL10表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生理学报 2023年第2期75卷 153-159页

作者：史子毕胡月阮倩倩范明赵名朱玲玲军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所北京100850 安徽医科大学生命科学学院合肥230032 南华大学衡阳医学院衡阳421001 南通大学神经再生协同创新中心南通226001

本文旨在观察低氧处理对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞CXC趋化因子配体10(CXC-chemokine ligand-10,CXCL10)表达的影响,并探讨其作用机制。将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、低氧组、LPS组以及低氧联合LPS组,LPS组腹腔... 详细信息

本文旨在观察低氧处理对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞CXC趋化因子配体10(CXC-chemokine ligand-10,CXCL10)表达的影响,并探讨其作用机制。将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、低氧组、LPS组以及低氧联合LPS组,LPS组腹腔注射0.5 mg/kg LPS,低氧组放置于低压低氧舱(模拟海拔6000 m)中,处理6 h后收集血清和海马组织样品。用ELISA法检测血清和海马组织中CXCL10的含量。用低氧(1%O_(2))和/或LPS(100 ng/mL)刺激小胶质细胞系BV2和原代小胶质细胞6 h,用实时定量PCR检测细胞CXCL10 mRNA表达水平,用ELISA检测细胞培养上清中CXCL10的含量,用Western blot检测核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路相关蛋白p65和IκBα的表达。另外,用小分子化合物PDTC阻断NF-κB信号通路后检测BV2细胞CXCL10 mRNA表达水平。结果显示,在LPS诱导的小鼠炎症模型中,低氧处理可促进LPS对小鼠血清和海马组织中CXCL10水平的上调作用。和LPS单独处理的细胞相比,低氧联合LPS处理的BV2细胞CXCL10 mRNA表达水平和培养上清中的CXCL10含量均显著上调;低氧联合LPS处理的原代小胶质细胞CXCL10 mRNA水平显著上调。和低氧或LPS单独处理的细胞相比,低氧联合LPS处理的BV2细胞p65和IκBα磷酸化水平显著提高。NF-κB信号通路特异性抑制剂PDTC可阻断LPS对BV2细胞CXCL10 mRNA表达的诱导作用。以上结果提示,在动物和细胞模型中,低氧均能够促进LPS对CXCL10的诱导作用,NF-κB信号通路在其中起着重要的作用。

关键词：脂多糖低氧小胶质细胞 CXC趋化因子配体10

低氧对Caco-2细胞P-gp表达及功能的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南大学学报（医学版） 2023年第4期48卷 491-498页

作者：赵安鹏牟宏芳姚菀腾常熙雯李文斌王荣中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院药剂科兰州730050 兰州大学药学院兰州730000

目的:低氧会改变许多药物的口服生物利用度,其中也包括多种P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的底物(药物),提示低氧可能影响肠上皮细胞P-gp的功能。Caco-2细胞单层膜模型是当前研究肠上皮P-gp功能的经典模型。本研究通过结合Caco-2细胞单... 详细信息

目的:低氧会改变许多药物的口服生物利用度,其中也包括多种P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的底物(药物),提示低氧可能影响肠上皮细胞P-gp的功能。Caco-2细胞单层膜模型是当前研究肠上皮P-gp功能的经典模型。本研究通过结合Caco-2细胞单层膜模型与低氧处理,研究低氧对Caco-2细胞P-gp表达和功能的影响,有助于阐明高原低氧环境改变肠上皮药物转运的机制。方法:正常培养的Caco-2细胞在1%的O_(2)浓度条件下分别培养24、48、72 h,提取膜蛋白后,采用蛋白质印迹法检测P-gp的表达水平,选择表达变化最显著的缺氧时间用于后续研究。于transwell小室中培养Caco-2细胞21 d,建立Caco-2细胞单层膜模型后,将其分为常氧对照组与低氧组,常氧对照组以正常条件继续培养72 h,低氧组在1%的O_(2)浓度条件下继续培养72 h,通过跨膜电阻(transepithelial electrical resistance,TEER)、荧光黄表观渗透系数(apparent permeability coefficient,Papp)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性及透射电镜下观察微绒毛与紧密连接结构,评价Caco-2细胞单层膜的完整性和极化状态。采用双向转运实验检测P-gp特异性底物罗丹明123(rhodamine 123,Rh123)的Papp,计算外排率。将Caco-2细胞在塑料培养瓶中连续培养21 d形成Caco-2细胞单层膜,在1%O_(2)浓度条件下处理72 h后,采用蛋白质印迹法检测膜蛋白中P-gp的表达水平。结果:1%的O_(2)浓度处理下调Caco-2细胞P-gp的表达,其中处理72 h下调最为显著(P低氧组Caco-2细胞单层膜TEER大于400Ω·cm^(2),荧光黄Papp小于5×10^(-7)cm/s,肠腔侧与基底侧AKP活性比值大于3。表明Caco-2细胞单层膜模型建立成功,且低氧处理未影响模型的完整性与极化状态。与常氧对照组相比,低氧组Caco-2细胞单层膜Rh123的外排率显著降低(P低氧抑制Caco-2细胞P-gp功能,其可能与P-gp表达水平降低有关。

关键词： Caco-2细胞单层膜 P糖蛋白低氧药物转运蛋白药物肠吸收

低氧诱导长链非编码核内小RNA宿主基因14促进胶质瘤替莫唑胺耐药的机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南大学学报（医学版） 2022年第7期47卷 829-838页

作者：赵海婷孟莉廖新斌刘燚莫鑫龚梦麒廖艺玮中南大学湘雅医院神经内科长沙410008 中南大学湘雅医院放射科长沙410008 中南大学湘雅医院神经外科长沙410008

目的:探讨低氧诱导的长链非编码核内小RNA宿主基因14(long non-coding small nucleolar RNA host gene 14,lncRNA SNHG14)在胶质瘤替莫唑胺(temozolomide,TMZ)耐药中的作用和潜在机制。方法:根据不同处理将实验分为常氧组、低氧组、对照... 详细信息

目的:探讨低氧诱导的长链非编码核内小RNA宿主基因14(long non-coding small nucleolar RNA host gene 14,lncRNA SNHG14)在胶质瘤替莫唑胺(temozolomide,TMZ)耐药中的作用和潜在机制。方法:根据不同处理将实验分为常氧组、低氧组、对照组(NC组)和TMZ组,利用real-time PCR和蛋白质印迹法分别检测胶质瘤细胞SNB19和U251中lncRNA SNHG14和O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(O6-methylguanine DNA methyltransferase,MGMT)的表达水平,分析lncRNA SNHG14表达水平与低氧和TMZ处理的关系。利用siRNA干扰胶质瘤细胞中lncRNA SNHG14表达,将转染后的胶质瘤细胞分为si-对照组(si-NC组)和si-SNHG14组,利用real-time PCR检测干扰效率,并采用蛋白质印迹法检测TMZ敏感性调控关键因子MGMT的表达变化,采用流式细胞术检测细胞凋亡;此外,增设常氧组和低氧组,应用MTT法检测不同TMZ浓度梯度下各组胶质瘤的细胞活性,分析lncRNA SNHG14对胶质瘤TMZ敏感性的影响。利用在线工具针对性地预测与lncRNA SNHG14和MGMT结合的miRNAs。应用realtime PCR观察不同环境下si-NC组、si-SNHG14组、常氧组和低氧组miR-143的丰度变化。利用miR-143拟似剂(mimics)和抑制剂(inhibitor)改变胶质瘤细胞中miR-143水平,将实验设置为NC inhibitor组、miR-143 inhibitor组、NC mimics组和miR-143 mimics组,采用real-time PCR检测干扰效率,应用蛋白质印迹法检测MGMT的表达水平,分析miR-143对MGMT水平的影响。对NC inhibitor组、miR-143 inhibitor组、NC mimics组和miR-143 mimics组进行不同干预,采用双荧光素酶报告实验观察lncRNA SNHG14和MGMT荧光素酶的活性变化,验证lncRNA SNHG14、miR-143和MGMT之间的靶向调控关系。最后,设置NC组和lncRNA SNHG14过表达组,通过RNA结合蛋白免疫沉淀实验检测各组中miR-143和MGMT的丰度变化,分析lncRNA SNHG14、miR-143和MGMT间的竞争结合关系。结果:与常氧组相比,低氧组可以促进胶质瘤细胞中lncRNA SNHG14表达;与NC组相比,TMZ组能显著抑制lncRNA SNHG14的表达(均P低氧组的细胞活力显著高于常氧组(均P低氧组miR-143丰度显著低于常氧组,si-SNHG14组miR-143丰度显著高于si-NC组(均P0.05);miR-143 inhibitor组MGMT蛋白水平显著上调(P0.05);miR-143 mimics组野生型SNHG14和MGMT的荧光素酶活性显著下调,而miR-143 inhibitor组野生型SNHG14和MGMT的荧光素酶活性显著上调(分别P0.05)。RNA结合蛋白免疫沉淀实验结果显示:与NC组相比,过表达lncRNA SNHG14组细胞中沉淀的argonaute 2蛋白上结合有更多的lncRNA SNHG14,但MGMT mRNA丰度却出现显著下降,差异均有统计学意义(均P低氧下胶质瘤细胞中表达上调的lncRNA SNHG14靶向miR-143,解除miR-143对MGMT的抑制,从而促进胶质瘤细胞产生TMZ耐药。

关键词：胶质瘤低氧替莫唑胺耐药长链非编码RNA

低氧及酸化胁迫对大黄鱼幼鱼离子调节与鳃组织结构的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

应用生态学报 2022年第2期33卷 551-559页

作者：曾姣王倩王亚冰彭士明陈润马凌波王翠华中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

为探讨大黄鱼幼鱼在低氧及酸化胁迫下机体离子调节情况,本研究探讨了低氧(溶解氧量DO 3.5 mg·L^(-1),pH 8.1)、酸化(DO 7.0 mg·L^(-1),pH 7.35)以及低氧酸化协同胁迫(DO 3.5 mg·L^(-1),pH 7.35)对大黄鱼幼鱼鳃组织结构以及离子调节... 详细信息

为探讨大黄鱼幼鱼在低氧及酸化胁迫下机体离子调节情况,本研究探讨了低氧(溶解氧量DO 3.5 mg·L^(-1),pH 8.1)、酸化(DO 7.0 mg·L^(-1),pH 7.35)以及低氧酸化协同胁迫(DO 3.5 mg·L^(-1),pH 7.35)对大黄鱼幼鱼鳃组织结构以及离子调节相关生理指标的影响。结果表明:低氧胁迫下,大黄鱼幼鱼鳃Na^(+)/K^(+)-ATP酶活力、血清Na^(+)、Ca^(2+)及Cl-含量随胁迫时间的延长呈先递减后递增的趋势。酸化胁迫下,大黄鱼幼鱼鳃Ca^(2+)-ATP酶活力、血清Na^(+)及Ca^(2+)含量呈先递增后递减的趋势。低氧酸化协同胁迫下,Na^(+)/K^(+)-ATP酶活力及Na^(+)、K^(+)、Ca^(2+)含量呈先递增后递减的趋势,Ca^(2+)-ATP酶活力、Cl-含量则呈先递减后递增的趋势。鳃组织学结果表明,低氧、酸化胁迫均导致鳃小片上皮细胞出现脱离现象,低氧酸化协同胁迫导致鳃小片上皮细胞出现增生、肥大、隆起现象。综合分析表明,低氧及酸化胁迫影响了大黄鱼幼鱼主要离子调节酶活力并对鳃组织造成了不同程度的损伤,最终导致了大黄鱼幼鱼体内离子调节失衡。

关键词：低氧酸化大黄鱼 Na^(+)/K^(+)-ATP酶 Ca^(2+)-ATP酶血清离子

低氧条件下小分子化合物VCR组合诱导大鼠成纤维细胞重编程神经前体细胞的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

四川大学学报（医学版） 2022年第5期53卷 790-797页

作者：王圆圆孙婷婷杨盼徐佳佳梁宇吴凡马彩云王春景刘长青郭俣蚌埠医学院生命科学学院蚌埠233000 蚌埠医学院临床医学院蚌埠233000 蚌埠医学院检验医学院蚌埠233000

目的探讨大鼠胚胎成纤维细胞(rat embryoic fibroblasts, REFs)在低氧条件下(5%O)重编程为化学诱导大鼠神经前体细胞(chemically induced rat neural progenitor cells, ciRNPCs)的方法体系。方法分两阶段将REFs重编程为ciRNPCs,第一阶段是化学诱导产生中间态细胞,REFs在低氧条件下采用含有小分子化合物的组合VCR(valproic acid、CHIR99021和RepSox)和10 000 U/mL白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)的KSR培养基培养15 d,观察到致密细胞集落即中间态细胞形成;第二阶段是特异性诱导ciRNPCs,用胰酶消化中间态细胞,接种至低黏附板,在常氧条件下可形成ciRNPCs神经球。CM-DiI标记后,定向移植至大鼠黑质-纹状体,通过免疫荧光检测ciRNPCs在宿主脑内存活、迁移及分化状况。结果低氧诱导5~10 d时已观察到明显细胞聚集趋势,15 d时已形成聚集紧密的克隆,1×10^(5)个细胞中大约产生30个克隆,同时大部分细胞克隆碱性磷酸酶染色呈阳性,消化重铺后2 d即可观察到有神经胚球形成,并可表达神经前体细胞(neural progenitor cells, NPCs)表面特征性抗原(Nestin、Sox2和Pax6),而且具有向神经胶质细胞和神经元分化的能力,分别表达GFAP和Tuj1特异性标志物。移植8周后,大鼠脑内可分化为GFAP^(+)和Tuj1^(+)细胞。结论小分子化合物VCR组合在低氧条件下可直接诱导REFs重编程为ciRNPCs,并具备体内与体外诱导分化为神经胶质细胞和神经元的潜能,为ciRNPCs移植治疗神经损伤疾病奠定基础。

关键词：小分子化合物组合低氧细胞重编程神经前体细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

低氧促进肺腺癌A549细胞迁移的机制

中国应用生理学杂志 2022年第1期38卷 68-75页

作者：金家豪赵宝生刘玉珍新乡医学院第一附属医院胸外科河南卫辉453100 新乡医学院第一附属医院生命科学研究中心河南卫辉453100

目的:探讨低氧促进肺腺癌A549细胞迁移的机制。方法:培养肺腺癌A549细胞,转染慢病毒获得稳定敲低ACC1的A549细胞株,转染si-RNA获得敲低SREBP-1的A549细胞。分别以低氧(5%O_(2))联合低氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂PX-478(25μmol)处理A... 详细信息

目的:探讨低氧促进肺腺癌A549细胞迁移的机制。方法:培养肺腺癌A549细胞,转染慢病毒获得稳定敲低ACC1的A549细胞株,转染si-RNA获得敲低SREBP-1的A549细胞。分别以低氧(5%O_(2))联合低氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂PX-478(25μmol)处理A549细胞,低氧联合亚油酸(LA)(20μmol)处理敲低ACC1的A549细胞,低氧处理敲低胆固醇调节原件结合蛋白1(SREBP-1)的A549细胞。Transwell实验检测细胞迁移,蛋白质印迹法检测HIF-1α、ACC1及上皮-间质转化(EMT)相关波形蛋白(Vimentin)及E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达与SREBP-1的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测低氧联合HIF-1α抑制剂PX-478(25μmol)处理A549细胞后ACC1及SREBP-1 mRNA水平变化。每项实验重复三次。结果:与常氧组相比,低氧组A549细胞迁移数增加,ACC1与HIF-1α表达上调(P均低氧对照组相比,PX-478(25μmol)抑制A549细胞迁移,SREBP-1表达下调(P低氧处理A549细胞后ACC1 mRNA上升(P低氧并使用PX-478(25μmol)处理A549细胞24 h,ACC1 mRNA水平下降(P低氧处理si-SREBP-1组与si-NC组,与对照组相比si-SREBP-1组细胞迁移数减少(P0.05);Western blot检测到si-SREBP-1组ACC1表达较对照组下降(P低氧处理si-SREBP-1组,ACC1表达较对照组下降(P0.05);低氧处理敲低ACC1的A549细胞并给予LA(25μmol)促进A549细胞迁移(P低氧通过HIF-1α/SREBP-1/ACC1途径调节脂肪酸代谢进而促进肺腺癌A549细胞迁移。

关键词：肺腺癌低氧乙酰辅酶A羧化酶1 低氧诱导因子1α 固醇调节元件结合蛋白1 迁移

低氧负荷在评估阻塞性睡眠呼吸暂停系统损害中的价值

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华结核和呼吸杂志 2022年第6期45卷 609-613页

作者：王星赵静怡袁海波吉林大学第一医院呼吸与危重症医学科睡眠中心长春130021

阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)是由于上气道阻塞导致气流减少或暂停、以间歇性缺氧和睡眠片段化为特征的一种常见睡眠呼吸障碍。OSA可引起全身各靶器官系统的损害,尤以心血管系统为著,严重影响了患者的生活质量。因而,关于OSA引起系统性损害... 详细信息

阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)是由于上气道阻塞导致气流减少或暂停、以间歇性缺氧和睡眠片段化为特征的一种常见睡眠呼吸障碍。OSA可引起全身各靶器官系统的损害,尤以心血管系统为著,严重影响了患者的生活质量。因而,关于OSA引起系统性损害的评估以及评价指标的研究日益受到重视,以便对OSA进行早期预防和治疗。然而,由于睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)等传统指标在评估疾病严重性等方面具有局限性,有必要探索其他评价指标以获取OSA多维度的特征。低氧负荷可以更好地量化OSA的严重程度、捕捉OSA相关的疾病负荷。本文立足低氧负荷这一指标,综述其定义及提出、测算方法及其在OSA所致不良后果预测中的优势及临床意义,以期为对OSA患者实现更好的管理提供依据。

关键词：阻塞性睡眠呼吸暂停睡眠呼吸障碍间歇性缺氧心血管系统上气道阻塞低氧靶器官系统损害

低氧诱导肺动脉平滑肌细胞表型转化机制的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江大学学报（医学版） 2022年第6期51卷 750-757页

作者：毛稼琦马兰青海大学医学部青海西宁810001 青海大学高原医学研究中心青海西宁810001

肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的表型转化是肺血管重塑的关键因素,抑制或逆转表型转化可以抑制肺血管重塑进程,进而控制低氧性肺动脉高压的疾病进展。研究发现,低氧可以通过引发超氧代谢导致细胞内氧化应激状态;通过激活细胞内外多条信号通... 详细信息

肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的表型转化是肺血管重塑的关键因素,抑制或逆转表型转化可以抑制肺血管重塑进程,进而控制低氧性肺动脉高压的疾病进展。研究发现,低氧可以通过引发超氧代谢导致细胞内氧化应激状态;通过激活细胞内外多条信号通路改变细胞表型标志蛋白的表达;通过调控非编码RNA进而影响细胞标志基因转录;通过诱导内皮细胞信号串扰降低收缩型细胞标志物的表达;通过诱导细胞过度自噬、产生内质网应激和诱导线粒体功能受损等多种途径引起PASMC稳态破坏,导致细胞表型转化。本文综述了上述关于低氧诱导PASMC表型转化的相关研究,为寻找抑制表型转化的靶点提供思路,为改善低氧性肺动脉高压等肺血管重塑疾病的研究提供参考。

关键词：肺动脉平滑肌细胞表型转化低氧综述

低氧培养BMSCs的外泌体促进软骨再生的机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华骨科杂志 2023年第12期43卷 831-840页

作者：沈凯翟晨骏左强梁文卫范卫民刘锋南京医科大学第一附属医院骨科南京210029 江苏大学附属宜兴医院骨科宜兴214221

目的探讨低氧培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源的外泌体中miR-196b-5p对软骨细胞功能的影响及作用机制,并分析其在软骨再生修复中的应用。方法将软骨细胞分别在常氧培养和低氧培养的BMSCs上清液中培... 详细信息

目的探讨低氧培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源的外泌体中miR-196b-5p对软骨细胞功能的影响及作用机制,并分析其在软骨再生修复中的应用。方法将软骨细胞分别在常氧培养和低氧培养的BMSCs上清液中培养,通过CCK-8检测软骨细胞的增殖能力,qPCR检测Ⅱ型胶原(collagen type 2,Col2)、Col1、Aggrecan、SOX9的表达情况,评估低氧培养后BMSCs的外泌体对软骨细胞功能的影响。通过超速离心法获取常氧外泌体和低氧外泌体,采用CCK-8和qPCR检测对比低氧BMSCs外泌体和常氧BMSCs外泌体对软骨细胞增殖及合成代谢相关基因表达的促进作用。验证外泌体miRNA测序结果中低氧外泌体miR-196b-5p的表达情况,敲除低氧BMSCs中miR-196b-5p进行功能抑制实验,对比miR-196b-5p在低氧外泌体促进软骨细胞功能中发挥的作用。使用生物信息学工具预测并验证miR-196b-5p下游靶点。通过转染siRNA分析低氧BMSCs外泌体中miR-196b-5p促进软骨细胞功能的作用机制。采用丝素水凝胶负载低氧外泌体及低表达miR-196b-5p的低氧外泌体,注入裸鼠皮下后培养4周后对取出的组织块行番红O、马松组织学染色及硫酸糖胺聚糖、胶原生化含量检测,评估低氧外泌体及miR-196b-5p在软骨再生修复中的应用情况。结果低氧组软骨细胞吸光度为1.20±0.07,较常氧组的0.94±0.04高,差异有统计学意义(P低氧组软骨细胞Col2(2.95±0.17)、Aggrecan(2.45±0.27)、SOX9(2.92±0.29)的表达高于常氧组(1.89±0.09、1.67±0.21、1.76±0.16),差异有统计学意义(P低氧外泌体组软骨细胞的增殖能力(1.28±0.04)较常氧外泌体组(1.05±0.06)更高,差异有统计学意义(P低氧BMSCs外泌体组软骨基质sGAG(383.2±21.54)和胶原含量(67.40±3.45)增多,低氧BMSCs外泌体miR-196b-5p敲低组sGAG(258.4±19.50)和胶原含量(57.15±4.95)降低,差异均有统计学意义(P低氧外泌体通过miR-196b-5p抑制软骨细胞中BACH1的表达,促进软骨细胞功能,可应用于软骨再生修复。

关键词：骨髓间充质干细胞低氧外泌体 miR-196b-5p 软骨再生