PLSCR1在苦参碱逆转APL细胞维甲酸耐药中的意义

作     者：吴迪炯 刘婷婷 周琦浩 孙洁 邵科钉 叶宝东 周郁鸿 WU Di-jiong;LIU Ting-ting;ZHOU Qi-hao;SUN Jie;SHAO Ke-ding;YE Bao-dong;ZHOU Yu-hong

作者机构：浙江中医药大学第一临床医学院血液科杭州310053 湖北省武汉市中医医院内科武汉430010 浙江大学附属第一医院骨髓移植中心杭州310006 

出 版 物：《中国中西医结合杂志》 (Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine)

年 卷 期：2015年第35卷第11期

页      面：1345-1350页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81503296) 浙江省自然科学基金资助项目(No.Y2101416,No.Y14H290012) 浙江省中医药优秀青年人才基金计划(No2013ZQ012) 浙江省教育厅科研计划项目(No.Y201223638) 

主　　题：磷脂爬行酶1 蛋白激酶A拮抗剂 苦参碱 急性早幼粒细胞白血病 维甲酸耐药 

摘      要：目的观察磷脂爬行酶1(phospholipid scramblase 1,PLSCR1)在苦参碱(matrine,MAT)诱导维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)耐药急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞分化的表达,并探讨其与环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)途径的相关性。方法以ATRA敏感的APL细胞系NB4以及ATRA耐药株NB4-R1为研究对象。通过NBT还原实验以及流式细胞仪(CD11 b)检测0.1 mmol/L MAT联合1μmol/L ATRA对两细胞株分化标记的影响;采用Western blot、实时荧光定量PCR技术测定细胞PML/RARα、PLSCR1蛋白及基因表达;同时应用PKA拮抗剂H89联合作用,观察细胞分化抗原及上述蛋白/基因表达的变化。结果 MAT联用ATRA能明显提高NB4-R1细胞NBT及CD1 1 b阳性率,并显著下调PML/RARα融合蛋白/基因的表达(P0.05,P0.01)。单用ATRA能使NB4细胞PLSCR1在蛋白及mRNA水平表达均得到明显增强(P0.01),而在NB4-R1细胞内同样表达上调,但仅蛋白水平差异有统计学意义(P0.01)。在联用MAT后,两细胞株PLSCR1蛋白表达进一步上升(P0.01),并且NB4-R1细胞mRNA表达水平差异有有统计学意义(P0.05)。上述作用均能被10μmol/L H89逆转(P0.05,P0.01)。结论 MAT联合ATRA能显著诱导NB4-R1细胞获得再分化,同时抑制PML/RARα融合基因/蛋白的表达,这可能与其上调PLSCR1表达有关。