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苦参碱调节RhoA-ROCK信号通路对冠心病模型大鼠Th17/Treg细胞平衡的影响

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中药新药与临床药理 2024年第3期35卷 349-357页

作者：哈斯高娃乌吉斯古楞内蒙古医科大学附属医院老年医学中心内蒙古呼和浩特010050 内蒙古医科大学附属医院肝胆外科内蒙古呼和浩特010050

目的探讨苦参碱(Matrine)对冠心病(coronary heart disease,CHD)大鼠辅助T细胞17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞平衡及Ras同源基因家族成员A(RhoA)-Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路的影响。方法建立冠心病模型,将实验大鼠分为对照组、模型组、苦参碱低剂量(50 mg·kg^(-1))组、苦参碱高剂量(200 mg·kg^(-1))组及苦参碱高剂量(200 mg·kg^(-1))+LPA组(10 mg·kg^(-1))。超声心动图进行大鼠心功能检测;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法进行白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平检测;流式细胞术检测Th17、Treg数量及Th17/Treg比值;免疫组化进行内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)蛋白表达水平检测;Masson染色进行大鼠心肌组织的病理形态变化观察;TTC染色检测各组大鼠心肌梗死情况;TUNEL染色进行心肌组织中细胞凋亡情况检测;试剂盒检测RhoA活性;Western Blot法进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达水平检测。结果与对照组比较,模型组心肌组织有大量蓝色胶原纤维沉积,左室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume,LVESV)、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平明显升高,左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室缩短分数(left ventricular shortening fraction,LVFS)、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平明显降低(P苦参碱高剂量组心肌组织蓝色胶原纤维逐渐减少,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平依次明显降低,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平依次明显升高(P苦参碱高剂量组比较,苦参碱高剂量+LPA组心肌组织蓝色胶原纤维增多,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平明显升高,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平明显降低(P苦参碱通过抑制RhoAROCK信号通路调节Th17/Treg细胞平衡,改善冠心病大鼠心肌损伤。

关键词：苦参碱冠心病 Ras同源基因家族成员A-Rho相关的卷曲螺旋激酶信号通路(RhoA-ROCK) 辅助T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg) 心肌损伤大鼠

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苦参碱对椎间盘退变大鼠髓核细胞凋亡的影响

中国组织工程研究 2024年第27期28卷 4281-4287页

作者：王冲孔丽崔学超鲍铁周河南中医药大学骨伤学院河南省郑州市450000 河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院)颈肩腰腿痛中心河南省洛阳市471002

背景:髓核细胞凋亡是引发椎间盘退变的主要病理基础,炎症和过氧化反应是导致髓核细胞凋亡的重要因素。研究表明苦参碱具有抗氧化、衰老、炎症和细胞凋亡等作用,可作为治疗椎间盘退变的潜在药物。目的:观察苦参碱调节环状GMP-AMP合成酶-... 详细信息

背景:髓核细胞凋亡是引发椎间盘退变的主要病理基础,炎症和过氧化反应是导致髓核细胞凋亡的重要因素。研究表明苦参碱具有抗氧化、衰老、炎症和细胞凋亡等作用,可作为治疗椎间盘退变的潜在药物。目的:观察苦参碱调节环状GMP-AMP合成酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)信号通路对椎间盘退变大鼠髓核细胞凋亡的影响。方法:①将处于对数生长期的大鼠髓核细胞分6组处理:除对照组外,模型组、苦参碱低剂量组、苦参碱高剂量组、空载组、苦参碱高剂量+cGAS过表达组采用氧糖剥夺建立椎间盘退变细胞模型,造模同时苦参碱低剂量组、苦参碱高剂量组分别给予0.4,0.8 mmol/L苦参碱处理,空载组转染空载质粒,苦参碱高剂量+cGAS过表达组给予0.8 mmol/L苦参碱处理并转染cGAS过表达质粒。处理24 h后,检测细胞活性与凋亡,细胞内活性氧、超氧化物歧化酶、肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β水平,以及细胞内凋亡蛋白、cGAS-STING通路蛋白表达。②将60只SD大鼠随机分为6组,每组10只:除对照组外,模型组、苦参碱低剂量组、苦参碱高剂量组、空载组、苦参碱高剂量+cGAS过表达组建立椎间盘退变模型;造模12周后,苦参碱低剂量组、苦参碱高剂量组分别灌胃给予60,120 mg/kg苦参碱(1次/d),空载组尾静脉注射空载质粒(2次/周),苦参碱高剂量+cGAS过表达组灌胃给予120 mg/kg苦参碱+尾静脉注射cGAS过表达质粒,连续治疗3周。给药结束后取材,检测细胞凋亡,活性氧、超氧化物歧化酶、肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β水平,以及凋亡蛋白、cGAS-STING通路蛋白表达。结果与结论:①与对照组比较,模型组细胞活性、超氧化物歧化酶水平降低(P苦参碱可呈剂量依赖性地改善上述因细胞造模造成的各指标变化(P苦参碱的改善作用。②在动物实验中获得了与体外细胞实验类似的结果。③结果表明,苦参碱可通过阻断cGAS-STING信号传导抑制炎症和氧化应激反应,进而减轻椎间盘退变大鼠髓核细胞凋亡、提升其活性。

关键词：苦参碱 cGAS-STING通路椎间盘退变髓核细胞细胞凋亡

苦参碱通过HMGB1/TLR4/NF-κB通路对胃溃疡大鼠溃疡修复的影响

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中药药理与临床 2024年第1期40卷 42-47页

作者：支姗池文婕张旭康金旺河北北方学院附属第二医院消化内科张家口075000

目的:探讨苦参碱对胃溃疡(GU)大鼠炎症反应和溃疡修复的影响及对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法:取SD雄性大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、苦参碱0.1、0.2 g/kg组、甘草... 详细信息

目的:探讨苦参碱对胃溃疡(GU)大鼠炎症反应和溃疡修复的影响及对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法:取SD雄性大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、苦参碱0.1、0.2 g/kg组、甘草酸(HMGB1抑制剂)0.03 g/kg组、苦参碱0.2 g/kg+甘草酸0.03 g/kg组,每组12只;除假手术对照组外,其余各组均用乙酸烧灼法建立GU大鼠模型,并于造模成功后灌胃给药,1次/d,连续给药28 d。观察大鼠一般行为变化;检测大鼠溃疡指数、溃疡抑制率;透射电镜观察大鼠胃黏膜组织形态变化;TUNEL法检测大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡率;免疫荧光检测TLR4在胃黏膜组织中阳性表达水平;免疫组化法检测HMGB1、NF-κB在胃黏膜组织中阳性表达水平;蛋白印迹法检测白细胞介素-6(IL-6)、环氧合酶-2(COX-2)、髓样分化因子88(MyD88)、DNA损伤标记蛋白-磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)、修复关键蛋白-羧基末端连接蛋白反应蛋白(CtIP)和Rad51蛋白表达情况。结果:与假手术对照组比较,模型对照组大鼠躬背蜷缩、便脓血及胃黏膜出血、胃黏膜上皮细胞结构损伤严重,溃疡指数、胃黏膜上皮细胞凋亡率、TLR4、HMGB1、NF-κB、IL-6、COX-2、MyD88、γH2AX蛋白表达显著上调,CtIP、Rad51蛋白表达显著下调(P苦参碱0.1、0.2 g/kg组及甘草酸0.03 g/kg组大鼠便血及胃黏膜上皮细胞结构损伤缓解,溃疡指数、胃黏膜上皮细胞凋亡率显著降低,TLR4、HMGB1、NF-κB、IL-6、COX-2、MyD88、γH2AX蛋白表达显著下调,溃疡抑制率显著升高,CtIP、Rad51蛋白表达显著上调(P苦参碱0.2 g/kg+甘草酸0.03 g/kg组上述症状及指标改善效果显著优于苦参碱0.2 g/kg组(P苦参碱可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路激活,从而抑制炎症反应及胃黏膜上皮细胞凋亡,促进溃疡修复,改善GU大鼠胃黏膜组织损伤。

关键词：苦参碱胃溃疡大鼠高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核因子-κB信号通路炎症反应溃疡修复

苦参碱对糖尿病肾病大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第1期40卷 72-76页

作者：张云杨世霞马莉甘肃省中医院超声医学影像科甘肃兰州730050 甘肃省中医院肾内科甘肃兰州730050 兰州市第一人民医院心血管二科甘肃兰州730050

目的基于高迁移率族蛋白1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路,探讨苦参碱对糖尿病肾病大鼠的治疗作用及其作用机制。方法用高脂高糖饲养+链脲佐菌素(STZ)溶液注射的方法建立糖尿病肾病模型大鼠。将大鼠分为对照组、模型组、苦参碱组(200... 详细信息

目的基于高迁移率族蛋白1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路,探讨苦参碱对糖尿病肾病大鼠的治疗作用及其作用机制。方法用高脂高糖饲养+链脲佐菌素(STZ)溶液注射的方法建立糖尿病肾病模型大鼠。将大鼠分为对照组、模型组、苦参碱组(200 mg·kg^(-1)苦参碱)、HMGB1抑制剂组(10 mg·kg^(-1)甘草酸)。大鼠麻醉后采血,分别检测血糖和血脂水平、肾功能指标、炎性细胞因子水平,观察肾组织病理变化,以流式细胞仪检测大鼠脾组织Th1、Th2细胞水平,以蛋白质印迹法检测HMGB1/TLR4通路相关蛋白表达。结果对照组、模型组、苦参碱组和甘草酸组大鼠的空腹血糖(FBG)水平分别为(5.15±0.61)、(26.24±2.15)、(6.10±0.85)和(5.85±0.74)mmol·L^(-1),总胆固醇(TC)水平分别为(1.56±0.14)、(4.15±0.36)、(1.89±0.15)和(1.82±0.13)mmol·L^(-1),三酰甘油(TG)水平分别为(1.46±0.14)、(11.01±1.00)、(3.04±0.21)和(3.15±0.18)mmol·L^(-1),血清肌酸酐(SCr)水平分别为(23.45±3.26)、(69.78±7.32)、(38.71±5.45)和(41.36±6.02)mmol·L^(-1),尿素氮(BUN)水平分别为(6.27±1.03)、(17.02±1.72)、(9.32±1.04)和(8.35±1.34)μmol·L^(-1),肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平分别为(102.35±14.68)、(263.78±18.63)、(134.02±11.47)和(122.35±15.04)pg·mL^(-1),Th1/Th2细胞比值分别为2.71±0.45、14.23±1.01、4.38±0.64和4.03±0.49,HMGB1蛋白相对表达水平分别为0.25±0.03、1.33±0.16、0.64±0.06、0.61±0.08,TLR4蛋白相对表达水平分别为0.33±0.06、1.25±0.18、0.51±0.07和0.47±0.09。上述指标,模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P苦参碱组、甘草酸组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P苦参碱可以通过调节Th1/Th2细胞平衡,减轻糖尿病肾病大鼠肾组织炎症和病理损伤,这可能与抑制HMGB1/TLR4信号通路激活有关。

关键词：苦参碱高迁移率族蛋白1/Toll样受体4通路糖尿病肾病 Th1/Th2细胞

苦参碱减轻对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的研究

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中国临床药理学杂志 2024年第2期40卷 225-229页

作者：边亚礼杨艳双巩江华何新霞衡水市人民医院全科医学科河北衡水053000 衡水市人民医院病案科河北衡水053000

目的探讨注射用盐酸苦参碱对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的小鼠肝损伤的作用机制。方法将雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组,每组12只。除空白组外其余小组均腹部注射300 mg·kg^(-1)APAP进行急性肝损伤造模。低、... 详细信息

目的探讨注射用盐酸苦参碱对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的小鼠肝损伤的作用机制。方法将雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组,每组12只。除空白组外其余小组均腹部注射300 mg·kg^(-1)APAP进行急性肝损伤造模。低、中、高剂量实验组分别静脉注射0.7、1.4和2.8 mg·kg^(-1)苦参碱;空白组和模型组均尾部静脉注射10%葡萄糖溶液10 mL·kg^(-1)·d^(-1)。5组小鼠均治疗7 d。用酶联免疫吸附试验法检测谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,用试剂盒检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平。结果中、高剂量实验组和模型组、空白组的血清GOT分别为(5593.45±128.46)、(2316.24±125.37)、(8302.16±267.15)和(40.13±7.69)U·L^(-1),GPT分别为(6159.37±129.64)、(2597.10±120.37)、(81699.54±259.87)和(36.47±9.46)U·L^(-1),IL-6分别为(159.43±26.42)、(96.37±25.84)、(215.34±47.68)和(83.72±26.37)pg·mL^(-1),TNF-α分别为(327.68±38.37)、(249.69±44.97)、(477.68±58.59)和(254.35±50.67)pg·mL^(-1),SOD分别为(329.46±37.49)、(371.16±33.76)、(246.84±38.79)和(429.67±23.76)U·mg^(-1),MDA分别为(5.34±0.76)、(4.09±0.54)、(12.46±3.76)和(3.12±0.42)nmol·mg^(-1)。中、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P苦参碱对APAP诱导的药物性肝损伤具有显著的保护作用,其保护机制与抑制炎症反应和减轻氧化应激反应有关。

关键词：苦参碱对乙酰氨基酚药物性肝损伤炎症反应氧化应激反应

苦参碱通过Hippo信号通路促进大鼠皮肤创面愈合及血管生成

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医学研究与战创伤救治 2024年第1期37卷 23-31页

作者：曾华郑勇周林冯上新唐俊孙妍婧罗玮武汉市中医医院肛肠科武汉430014 武汉市中医医院病理科武汉430014 湖北省第三人民医院全科医学科武汉430030

目的探讨苦参碱(MT)对皮肤创面愈合的影响及可能机制。方法在48只大鼠中成功建立全层皮肤切除创伤模型,将模型大鼠随机分为阴性对照组(模型组,涂抹100μL等渗盐水)、阳性药物组(PD组,涂抹100μL的京万红软膏)、苦参碱组(MT组,涂抹浓度为... 详细信息

目的探讨苦参碱(MT)对皮肤创面愈合的影响及可能机制。方法在48只大鼠中成功建立全层皮肤切除创伤模型,将模型大鼠随机分为阴性对照组(模型组,涂抹100μL等渗盐水)、阳性药物组(PD组,涂抹100μL的京万红软膏)、苦参碱组(MT组,涂抹浓度为200 ng/mL的苦参碱混合液100μL)、苦参碱+维替泊芬组(MT+VP组,涂抹苦参碱混合液100μL后,腹腔注射100 mg/kg维替泊芬),每组12只。各组每日给药1次,持续7 d。比较各组大鼠的创面愈合率、病理组织损伤情况、CD31阳性染色细胞比例,以及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平。蛋白免疫印迹检测(Western blot)Hippo通路相关蛋白表达。结果造模后3、7、14 d时,与模型组创面愈合率[(14.02±1.87)%、(36.23±3.62)%、(65.53±3.85)%]相比,PD组[(21.36±2.51)%、(61.86±3.13)%、(94.26±0.26)%]和MT组[(21.57±2.24)%、(54.35±3.66)%、(94.18±3.13)%]均明显升高(P苦参碱能够通过抑制炎症反应、促进血管生成加速全层皮肤切除创伤大鼠的皮肤创面愈合,这一过程可能涉及苦参碱对Hippo-Yap通路的激活效应。

关键词：皮肤创面愈合苦参碱炎症血管生成 Hippo通路

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苦参碱药理作用、毒性以及临床应用研究进展

中国中医药信息杂志 2024年

作者：孙起超康云红徐静苗青黑龙江中医药大学附属第一医院

苦参碱具有多种药理作用，包括抗菌、抗炎及抗肿瘤等，临床上广泛用于肿瘤化疗的辅助药物。苦参碱既是中药的“活性”成分又是“毒性”成分，临床使用安全性尤为重要。本文从抗炎、抗癌、抗菌与抗病毒、心血管保护、神经保护、肝肾保护... 详细信息

苦参碱具有多种药理作用，包括抗菌、抗炎及抗肿瘤等，临床上广泛用于肿瘤化疗的辅助药物。苦参碱既是中药的“活性”成分又是“毒性”成分，临床使用安全性尤为重要。本文从抗炎、抗癌、抗菌与抗病毒、心血管保护、神经保护、肝肾保护及解毒作用等方面梳理苦参碱药理作用研究进展，并对其毒性及临床应用研究进行归纳，旨在为苦参碱合理应用提供参考。

关键词：苦参碱药理作用毒性临床应用

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苦参碱对缺血性脑卒中大鼠神经炎症的影响

中华老年心脑血管病杂志 2024年第4期26卷 455-459页

作者：孙海东邓敏苏霞潘微武汉市中医医院脑病科 430000 武汉市中医医院检验科

目的探究苦参碱调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)-晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路对缺血性脑卒中(IS)大鼠神经炎症的影响。方法将75只SD大鼠随机分为模型组、苦参碱低剂量组(10 mg/kg)、苦参碱高剂量组(20 mg/kg)、苦参碱高剂量+晚... 详细信息

目的探究苦参碱调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)-晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路对缺血性脑卒中(IS)大鼠神经炎症的影响。方法将75只SD大鼠随机分为模型组、苦参碱低剂量组(10 mg/kg)、苦参碱高剂量组(20 mg/kg)、苦参碱高剂量+晚期糖基化终末产物(AGE)血清蛋白组(20 mg/kg苦参碱+100 mg/kg AGE血清蛋白)和假手术组,每组15只。采用线栓法构建大鼠大脑中动脉闭塞模型。用Longa评分评估大鼠神经功能缺损;氯化三苯四氮唑染色检测脑梗死情况;苏木精-伊红染色观察海马组织病理变化;酶联免疫吸附测定海马组织白细胞介素(IL)1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。Western blot检测海马组织HMGB1、RAGE蛋白表达。结果苦参碱高剂量组Longa评分、脑梗死面积、IL-1β、IL-6、TNF-α、HMGB1和RAGE蛋白表达明显低于模型组和苦参碱低剂量组(P苦参碱高剂量+AGE血清蛋白组Longa评分、脑梗死面积、IL-1β、IL-6、TNF-α、RAGE蛋白表达明显高于苦参碱高剂量组[(2.93±0.30)分vs(1.10±0.12)分,(38.18±4.04)%vs(15.52±1.74)%,(78.57±8.33)pg/ml vs(39.27±4.76)pg/ml,(203.14±24.39)pg/ml vs(92.45±11.23)pg/ml,(243.53±26.81)pg/ml vs(150.49±18.79)pg/ml,0.73±0.07 vs 0.44±0.04,P苦参碱可能通过抑制HMGB1-RAGE信号通路减轻IS大鼠的神经炎症。

关键词：苦参碱卒中大鼠,Sprague-Dawley 模型,动物神经炎 HMGB1-RAGE信号通路

同位素内标法—超高效液相色谱/串联质谱法测定六堡茶中苦参碱和氧化苦参碱残留量

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食品与机械 2024年第3期40卷 89-94页

作者：石金娥张洪禹辛若竹丁梅奚广生梧州学院食品与制药工程学院广西梧州543002 梧州学院六堡茶现代产业学院广西梧州543002 梧州学院体育健康学院广西梧州543002 梅河口市食品药品检验检测中心吉林梅河口135000

目的:以广西六堡茶为例,建立超高效液相色谱—质谱/质谱(UPLC-MS/MS)分析方法测定苦参碱和氧化苦参碱残留量。方法:样品经乙腈水溶液(80%乙腈+0.2%氨水)超声提取,流动相为0.1%甲酸—水和0.1%甲酸—甲醇溶液,梯度洗脱,内标法定量。结果:... 详细信息

目的:以广西六堡茶为例,建立超高效液相色谱—质谱/质谱(UPLC-MS/MS)分析方法测定苦参碱和氧化苦参碱残留量。方法:样品经乙腈水溶液(80%乙腈+0.2%氨水)超声提取,流动相为0.1%甲酸—水和0.1%甲酸—甲醇溶液,梯度洗脱,内标法定量。结果:苦参碱和氧化苦参碱在0.1~80.0 ng/mL质量浓度范围内呈线性,相关系数均>0.9996,检出限均为1.0μg/kg,定量限均为3.0μg/kg,满足茶叶中苦参碱和氧化苦参碱残留量的监管判定要求。通过加标验证,回收率均为92.0%~104.7%,相对标准偏差(RSD)均苦参碱和氧化苦参碱提取回收率低、前处理复杂的问题,使苦参碱和氧化苦参碱出峰良好,抗干扰性强。

关键词：六堡茶苦参碱氧化苦参碱 UPLC-MS/MS