过氧化氢酶对人造血干细胞在免疫缺陷小鼠中植入的作用

作     者：师鸣 胡林萍 张孝兵 袁卫平 程涛 SHI Ming;HU Lin-Ping;ZHANG Xiao-Bing;YUAN Wei-Ping;CHENG Tao

作者机构：中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 

出 版 物：《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期：2015年第23卷第1期

页      面：183-189页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学] 

基　　金：天津市科学技术委员会自然基金(11JCZDJZ27900,13JCYBJC39400) 国家自然科学基金(81400150,81328004,81330015) 

主　　题：造血干细胞 间充质干细胞 过氧化氢酶 植入率 NOD/SCID小鼠 

摘      要：目的:研究人脐带组织来源的间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,UC-MSC)过表达过氧化氢酶(catalase,CAT)基因对人造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)移植作用的影响。方法:用携带GFP空载体与GFP-CAT载体的逆转录病毒感染UC-MSC,流式细胞术分选得到MSC-GFP和MSC-GFP-CAT两种细胞株,检测两种细胞株中CAT的mRNA表达水平和过氧化氢酶的酶活力;将其与人脐血CD34+细胞体外共培养;与人Lin-CD34+CD38-CD45RA-CD90+CD49f+Rholow细胞共同移植到NOD/SCID小鼠胫骨中,移植12周后,检测骨髓中的人CD45+细胞比例。结果:感染48 h后能够观察到UC-MSC发出绿色荧光,并能够稳定传代;流式细胞术分选后,MSC-GFP的纯度达到97.6%,MSC-GFP-CAT达到96.8%;MSC-GFP-CAT细胞中CAT的mRNA水平为对照组的23.9倍;体外检测UC-MSC、MSC-GFP和MSC-GFP-CAT细胞的酶活力分别为19.5、20.3、74.1 Unit;在共培养实验中,各组中的CD34+细胞比例无显著差异;在共移植实验中,HSC、MSC-GFP和MSC-GFP-CAT组中人CD45+细胞的比例分别为(3.22±3.1)%、(4.26±3.56)%和(7.37±4.51)%,MSC-GFP-CAT组的植入率为对照组MSC-GFP的1.7倍。结论:MSC-GFP-CAT对人HSC体外扩增无影响;MSC-GFP-CAT与人HSC共移植能够提高人HSC的植入率。