miR-15a-5p调控Wnt通路在百草枯致肺纤维化中的机制

作     者：王静 姬晓航 王蒙蒙 张炜 丁伟超 陈娟 冯靖 孟健康 孙兆瑞 聂时南 Wang Jing;Ji Xiaohang;Wang Mengmeng;Zhang Wei;Ding Weichao;Chen Juan;Feng Jing;Meng Jiankang;Sun Zhaorui;Nie Shinan

作者机构：南京大学医学院附属金陵医院(中国人民解放军东部战区总医院)急诊医学科南京210002 江苏大学医学院实验中心镇江212013 

出 版 物：《中华急诊医学杂志》 (Chinese Journal of Emergency Medicine)

年 卷 期：2024年第33卷第8期

页      面：1128-1133页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(82172182) 

主　　题：miRNA miR-15a-5p 百草枯 肺纤维化 16HBE细胞 Wnt信号通路 Wnt3α β-catenin EMT 

摘      要：目的探讨miR-15a-5p调控Wnt信号通路对PQ致肺纤维化的影响及分子机制。方法构建PQ诱导的16HBE细胞模型,采用高通量miRNA芯片技术和RT-qPCR筛选表达差异明显的miR-15a-5p进行实验。实验分组为:NC组(对照组):无特殊处理;PQ组:50μmol/L PQ处理细胞72 h;miR-15a-5p组:转染miR-15a-5p过表达慢病毒的16HBE稳转株;miR-15a-5p+PQ组:50μmol/L PQ处理稳转株细胞72 h。RT-qPCR和Western blot检测Wnt通路相关基因Wnt3α和β-catenin、成纤维细胞标记基因Collagen I、Vimentin和αSMA,上皮细胞标记基因Occludin和CK18表达情况。构建PQ诱导的肺纤维化小鼠模型,采用Western blot、HE染色和免疫组织化学检测蛋白表达及肺组织损伤情况。数据以均数±标准差(x±s)表示,采用独立样本t检验分析两组间数据。结果细胞损伤模型中,Wnt3α、β-catenin、成纤维细胞标记基因Collagen I、Vimentin和αSMA表达显著上调(P0.05),上皮细胞标记基因Occludin和CK18显著下调(P0.05),过表达miR-15a-5p可靶向抑制Wnt3α表达并缓解PQ诱导的EMT进程。动物模型中,Wnt3α、β-catenin、成纤维细胞标记基因Collagen I、Vimentin和αSMA蛋白水平显著升高(P0.01),肺组织结构紊乱并发生纤维化,过表达miR-15a-5p可抑制Wnt3α蛋白表达水平(P0.05)且改善肺组织损伤。结论miR-15a-5p可通过调控Wnt3α/β-catenin信号通路改善PQ导致的肺损伤,从而抑制肺纤维化的发生发展。