玉米大斑病菌支链氨基酸氨基转移酶基因的克隆与原核表达

作     者：张运峰 张淑红 许可 高凤菊 武秋颖 石洪凌 李艳梅 范永山 ZHANG Yun-feng;ZHANG Shu-hong;XU Ke;GAO Feng-ju;WU Qiu-ying;SHI Hong-ling;LI Yan-mei;FAN Yong-shan

作者机构：唐山师范学院生命科学系/唐山市农业病原真菌与毒素重点实验室河北唐山063000 

出 版 物：《玉米科学》 (Journal of Maize Sciences)

年 卷 期：2024年第32卷第6期

页      面：31-37页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：河北省重点研发计划项目(21374301D) 河北省自然科学基金项目(B2023105007,C2023105003) 唐山师范学院重点培育项目(ZDPY06、ZDPY08) 唐山市科技计划项目(21130201C) 

主　　题：玉米 大斑病菌 基因克隆 支链氨基酸转移酶 原核表达 

摘      要：支链氨基酸(Branched chain amino acid,BCAA)是生物体内重要的营养物质和信号分子,对蛋白质合成、糖代谢、氧化应激等有重要的调控作用。支链氨基酸氨基转移酶(branched-chain amino acid transaminase,BCAT)是BCAA分解代谢的关键酶,参与许多生理和病理过程。为明确BCAT对玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)生长发育和侵染的影响,克隆玉米大斑病菌BCAT基因(StBCAT1),该基因编码的StBCAT1含有保守结构域BCAT_beta_family,属于PLPDE_IV超家族,与玉米圆斑病菌(Helminthosporium carbonum)产生的寄主选择性毒素HC-toxin ToxF高度同源。为了获得大量高纯度的StBCAT1蛋白,构建该基因的原核表达载体,并转化BL21(DE3)菌株。经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western Blotting检测,结果表明,StBCAT1基因在大肠杆菌得到高效表达,获得了预期分子量为39.2 KD的StBCAT1蛋白。