基于TGF-β/Smads信号通路探讨香连化浊方对慢性萎缩性胃炎大鼠细胞周期和增殖的影响

作     者：王艺灿 王杰 程祎睿 李晓静 马益彬 刘秋华 刘紫薇 郭榆西 杜朋丽 才艳茹 杜姚 支政 李博林 杨倩 

作者机构：河北中医药大学第一附属医院 河北省浊毒证重点实验室 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家科技部重点研发课题项目(2018YFC1704100,2018YFC1704102) 国家中医药管理局第二批国家中医临床研究基地建设单位(国中医药科技函131号) 河北省科学技术厅河北省重点研发计划项目(21377724D,21377740D) 河北省中医药管理局2023年度中医药类科研计划项目(2023022) 河北省中医药管理局2022年度中医药类科研计划项目(2022026,2022032) 河北省中医药管理局2021年度中医药类科研计划项目(2021034) 河北省自然科学基金项目(H2023423001) 国家中医药管理局科技项目(GZY-KJS-2023-025) 

主　　题：香连化浊方 加权基因共表达网络分析(WGCNA) 慢性萎缩性胃炎 增殖 细胞周期 

摘      要：目的：运用生物信息学技术和动物实验探究香连化浊方调节细胞周期抑制增殖治疗萎缩性胃炎（CAG）的潜在作用机制。方法：利用GEO数据库和GEO2R工具筛选出CAG差异基因，使用加权基因共表达网络分析（WGCNA）寻找CAG的核心基因（hub gene），与GeneCards数据库获得细胞周期-增殖相关基因取交集，并进行富集分析，得到与CAG相关的信号通路和生物过程。基于STRING数据库进行PPI网络的构建，寻找核心基因2.0（hub gene2.0），并进行动物实验验证。从70只雄性Wistar大鼠中随机抽取14只作为正常组，其余56只大鼠采用“饥饱失常+N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）+水杨酸钠联合造模法制备CAG模型。将造模成功的大鼠随机分组，各组给予相应干预，疗程60 d。使用苏木精-伊红（HE）法观察大鼠胃黏膜组织病理学变化；透射电镜观察胃黏膜组织细胞超微结构，蛋白质印迹法（Western blot）检测胃黏膜组织中TGF-β1/Smads信号通路TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白，S/G2/M期标志物Geminin、增殖标志物Mcm2的蛋白相对表达量并进行spearman相关性分析。结果：最终得到包括TGF-β1在内的15个hub2.0基因，TGF-β1信号通路参与CAG发病。与正常组比较，模型组大鼠胃黏膜组织中TGF-β1、Smad2、Geminin、Mcm2蛋白表达升高（P0.05），Smad3蛋白表达水平明显下降（P0.05）；与模型组比较，各药物组胃黏膜组织中TGF-β1和geminin表达明显降低（P0.05），香连化浊方中高剂量组和摩罗丹组Smad2、Mcm2蛋白表达水平明显下降（P0.05），香连化浊中高剂量组和摩罗丹组Smad3蛋白表达水平明显上升（P0.05）。spearman相关性分析表明smad3和其余指标均负相关，其余指标之间均正相关（P0.01）。结论：香连化浊方可能通过抑制TGF-β1/Smads信号通路，调节细胞周期，抑制增殖治疗CAG。