β-内酰胺酶合并OmpK36膜孔蛋白缺失引起肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素敏感性的降低

作     者：张嵘 蔡加昌 周宏伟 陈功祥 ZHANG Rong;CAI Jia-chang;ZHOU Hong-wei;CHEN Gong-xiang

作者机构：浙江大学医学院附属第二医院检验科细菌室杭州310009 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2008年第28卷第1期

页      面：44-49页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主　　题：肺炎克雷伯菌 碳青霉烯 耐药性 β-内酰胺酶 膜孔蛋白 

摘      要：目的研究肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，Kp）对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的分子机制。方法临床分离到2株碳青霉烯敏感性降低的Kp Z2554和Z2110，经脉冲场凝胶电泳（PFGE）证实非同一克隆株。对2株细菌进行药物最低抑菌浓度测定（MIC）、接合试验、质粒图谱分析、等电聚焦电泳（IEF）、特异性PCR扩增和DNA序列分析、外膜蛋白分析以及羰酰氰氯苯腙（CCCP）抑制试验等。结果Kp Z2554和Z2110对亚胺培南和美罗培南的MIC为1～8μg／ml，前者对青霉素类、头孢菌素类和氨曲南等抗生素高度耐药，后者对上述抗生素的耐药程度稍弱于前者，但对头孢西丁的MIC大于512μg／ml。IEF、PCR扩增和DNA序列分析证实Kp Z2554产TEM-1（等电点5．4）和CTX-M-14（等电点7．9）2种β-内酰胺酶，Kp Z2110产TEM-1、CTX-M-14和DHA-1（等电点7．8）3种酶。SDS-PAGE分析显示2株细菌均有相对分子质量（Mr）为39×10^3蛋白条带（OmpK36）的缺失。外膜蛋白基因（ompK35和ompK36）序列分析发现，Kp Z2554和Z2110的ompK35基因的个别位点存在点突变，但氨基酸序列不变。CCCP抑制试验显示CCCP不能提高Kp Z2554和Z2110对碳青霉烯类抗生素的敏感性。结论β-内酰胺酶的产生合并OmpK36膜孔蛋白的缺失可引起蜘对碳青霉烯类抗生素敏感性的降低。