绿豆愈伤组织基因组DNA最佳提取方法的分析

作     者：王珅 范保杰 刘长友 王彦 时会影 张志肖 苏秋竹 沈颖超 田静 

作者机构：河北省农林科学院粮油作物研究所河北省作物遗传育种实验室 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2024年

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：国家食用豆产业技术体系(CARS-08-G03) 河北省杂粮杂豆种业科技创新团队(21326305D) 河北省现代产业技术体系杂粮杂豆创新团队(HBCT2018070203) 河北省农林科学院创新工程(2022KJCXZX-LYS-17) 河北省农林科学院基本科研业务费项目(2021060101)共同资助 

主　　题：绿豆(Vigna radiata) 愈伤组织 DNA提取 改良SDS法 

摘      要：为明确绿豆愈伤组织基因组DNA的最佳提取方法，本研究以河北省主推绿豆品种‘冀绿20号’诱导的愈伤组织为材料，采用十六烷基三甲基溴化铵法（CTAB）、改良十二烷基苯磺酸钠法（SDS）、进口试剂盒法(Promega Wizard?Genomic DNA Purification Kit)和国产试剂盒法（TIANGEN植物基因组DNA提取试剂盒）分别提取其基因组DNA，并对4种方法提取的绿豆愈伤组织基因组DNA浓度、纯度、完整性以及提取时间、PCR扩增效果等进行比较和分析。结果表明，CTAB法提取的绿豆愈伤组织基因组DNA浓度较低且含有杂质；Promega Wizard?Genomic DNA Purification Kit提取的DNA质量较好但浓度不高；植物基因组DNA提取试剂盒提取的DNA质量与浓度达不到理想要求；改良SDS法提取DNA的效果最好，DNA浓度达到456.63 ng/μL，OD260/OD280值为1.93，OD260/OD230值为2.17，DNA凝胶电泳条带清晰，PCR扩增产物亮度高且无杂带，此方法具有操作时间短、提取效率高、污染小等特点。本研究结果为绿豆愈伤组织高质量DNA的快速提取和检测提供一定的参考。