地西他滨通过DNA甲基化调控乳腺癌细胞中miR-1301-3p的表达及机制

作     者：李元 路玉祥 楚元奎 杨华 

作者机构：宁夏医科大学检验学院 

出 版 物：《中国医院药学杂志》 (Chinese Journal of Hospital Pharmacy)

年 卷 期：2024年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：宁夏自然科学基金项目( 编号: 2022AAC03135) 

主　　题：miR-1301-3p 乳腺癌 地西他滨 DNMT3B 

摘      要：目的：通过分析地西他滨（decitabine，DAC）诱导miR-1301-3p的DNA甲基化状态，探讨miR-1301-3p在乳腺癌中表达降低的调控机制。方法：生物信息学软件预测miR-1301-3p启动子区甲基化岛，甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR，MSP）检测miR-1301-3p启动子区的甲基化水平。应用MSP和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分别检测DAC对miR-1301-3p启动子甲基化和表达的影响。在乳腺癌细胞中转染sh-DNMT3B，qRT-PCR检测DNMT3B对miR-1301-3p表达的影响。MTT实验检测sh-DNMT3B及miR-1301-3p inhibitor对乳腺癌细胞增殖的影响。结果：miR-1301-3p的启动子区存在甲基化岛，且乳腺癌细胞中miR-1301-3p启动子区的甲基化水平高于正常乳腺上皮细胞。DAC处理乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF7 48h后，细胞中miR-1301-3p启动子区的甲基化产物均明显减少，miR-1301-3p基因表达水平显著增加；而沉默DNMT3B可促进miR-1301-3p的表达，并抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF7的增殖。共转染miR-1301-3p inhibitor和sh-DNMT3B，可逆转sh-DNMT3B对乳腺癌细胞的增殖的抑制作用。结论：miR-1301-3p位点高甲基化导致乳腺癌细胞中miR-1301-3p表达降低，DAC可能通过抑制DNMT3B的表达降低miR-1301-3p启动子区的甲基化水平，激活其表达，从而抑制乳腺癌细胞的增殖。