鼠尾草酸对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞基质降解的作用及机制

作     者：黄琴 周思齐 HUANG Qin;ZHOU Siqi

作者机构：武汉大学人民医院骨外科 

出 版 物：《武汉大学学报(医学版)》 (Medical Journal of Wuhan University)

年 卷 期：2024年第45卷第10期

页      面：1170-1175页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(编号:2042023kf0049) 

主　　题：骨关节炎 鼠尾草酸 软骨细胞 细胞外基质 NF-κB信号通路 白细胞介素-1β 

摘      要：目的：探讨鼠尾草酸（CAD）对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的大鼠软骨细胞基质降解的作用及机制。方法：体外培养原代大鼠软骨细胞并随机分成4组：对照组（Control）、IL-1β组（10 ng/mL）、CAD(4μmol/L)+IL-1β组和CAD(8μmol/L)+IL-1β组。处理24 h后，CCK-8检测不同浓度CAD(0、1、2、4、8、16、32和64μmol/L)对软骨细胞增殖的效应；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测软骨细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)、性别决定区域Y框蛋白9(Sox9)、Ⅱ型胶原蛋白α1链（Col2a1）和聚集蛋白聚糖（ACAN）mRNA的表达；免疫细胞荧光检测软骨细胞MMP13、Col2a1和P65蛋白的表达；Western Blot检测软骨细胞P65的蛋白表达及定量分析。采用分子对接验证CAD潜在的作用靶点。结果：与对照组相比，高浓度CAD(16、32和64μmol/L)以浓度依赖性的方式抑制软骨细胞增殖（P0.01）；进一步与对照组相比，IL-1β显著促进软骨细胞TNF-α、MMP13和ADAMTS5的表达并抑制Sox9、Col2a1和ACAN的表达，而CAD(4和8μmol/L)处理能够显著改善IL-1β诱导的软骨细胞基质降解（P0.05,P0.01）；机制层面，CAD能够显著抑制IL-1β诱导的P65核转位；分子对接显示CAD与P65具有较好的结合。结论：CAD能够显著改善IL-1β诱导的软骨细胞基质降解并通过P65抑制核因子-κB(NF-κB)信号通路。