EGFR二聚化B细胞表位抗原肽基因克隆、表达与纯化
Cloning,expression and purification of B cell epitope antigen peptide of EGFR dimerization作者机构：广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系广州510006
出 版 物：《免疫学杂志》 (Immunological Journal)
年 卷 期：2011年第27卷第10期
页 面：918-920页
核心收录：
学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学]
主 题：表皮生长因子受体 二聚化 B细胞表位 抗原肽 高效制备
摘 要：目的利用基因工程手段建立表皮生长因子受体(EGFR)二聚化B细胞表位抗原肽MVF-ER的高效制备方法。方法采用重叠延伸PCR扩增MVF-ER后克隆于表达载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,产物采用肠激酶酶切和镍离子螯合亲和层析法纯化。结果通过10对引物5步重叠延伸得到273 bp的扩增产物,目的基因与硫氧环蛋白(Trx)融合后可高效表达,经酶切和层析后得到纯度为95%的抗原肽。结论成功建立抗原肽MVF-ER的高效制备方法,为进一步研究EGFR过表达恶性肿瘤的治疗性疫苗打下了坚实基础。
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