低频低强度超声辐照微泡对三阴性乳腺癌MDA-MB 231/DOX细胞耐药性的影响

作     者：武志慧 曲妮娜 陈黄卓楠 王国运 毕梦露 刘核秀 曹小丽 WU Zhihui;QU Ni’na;CHEN Huangzhuonan;WANG Guoyun;BI Menglu;LIU Hexiu;CAO Xiaoli

作者机构：滨州医学院医学影像学院山东省烟台市264003 青岛大学附属烟台毓璜顶医院超声医学科 潍坊医学院医学影像学院 

出 版 物：《临床超声医学杂志》 (Journal of Clinical Ultrasound in Medicine)

年 卷 期：2024年第26卷第6期

页      面：441-447页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 100207[医学-影像医学与核医学] 1002[医学-临床医学] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：山东省自然科学基金项目(ZR2021MH398) 山东大学技术服务项目(1520020011) 

主　　题：超声辐照,低频,低强度 微泡 三阴性乳腺癌 多药耐药性 阿霉素 

摘      要：目的探讨低频低强度超声辐照微泡(LILFU-MB)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231/DOX细胞耐药性的影响。方法筛选LILFU-MB最佳非毒性辐照时间,计算细胞存活率;将MDA-MB-231/DOX细胞分为LILFU-MB辐照组和非LILFU-MB辐照组,绘制药物抑制拟合曲线图获得两组药物的半抑制浓度(IC_(50)),并筛选阿霉素最佳剂量。根据不同处理方式将细胞分为对照组、阿霉素组、LILFU-MB组、LILFU-MB+阿霉素组,观察细胞增殖活性,并计算细胞迁移率。使用倒置荧光显微镜观察细胞形态,并记录细胞核荧光强度及细胞核型;使用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Westernblot检测细胞蛋白表达情况。结果LILFU-MB最佳非毒性辐照时间为30 s,该条件下细胞存活率为(92.33±2.58)%,故后续实验中LILFU-MB辐照时间均采用此条件。LILFU-MB辐照组中阿霉素对耐药细胞的IC_(50)低于非LILFU-MB辐照组(7.51μmol/Lvs.35.40μmol/L),后续实验采用35.40μmol/L为阿霉素最佳剂量。阿霉素组和LILFU-MB+阿霉素组细胞增殖活性均受到明显抑制,增殖速度减慢,其中LILFU-MB+阿霉素组抑制效果最明显。对照组、阿霉素组、LILFU-MB组、LILFU-MB+阿霉素组细胞迁移率分别为(56.79±1.11)%、(51.34±4.66)%、(46.09±9.42)%、(22.01±6.02)%,其中LILFU-MB+阿霉素组细胞迁移率低于其余各组,差异均有统计学意义(均P0.01)。倒置荧光显微镜观察显示,LILFU-MB+阿霉素组中大部分细胞核明显皱缩和碎裂,胞核蓝染高亮,染色质呈浓缩和边缘化,表现出较强的细胞凋亡核型改变。流式细胞仪检测结果显示,对照组、阿霉素组、LILFU-MB组、LILFU-MB+阿霉素组细胞凋亡率分别为(13.30±0.66)%、(22.68±2.85)%、(20.60±3.72)%、(31.84±2.87)%,其中LILFU-MB+阿霉素组细胞凋亡率高于其余各组,差异均有统计学意义(均P0.05)。LILFU-MB+阿霉素组P-gp、Bcl-2蛋白表达均显著下调,Cyt-c、Cl-caspase3蛋白表达均显著上调,与其余各组比较差异均有统计学意义(均P0.05)。结论LILFU-MB能够显著抑制MDA-MB-231/DOX细胞增殖、迁移,并促进细胞凋亡,进而逆转三阴性乳腺癌MDA-MB-231/DOX细胞耐药性。