细胞外信号调节激酶信号通路在失血性休克致肺损伤中趋化因子分泌和中性粒细胞募集中的作用及其机制

作     者：李新新 肖鹏 叶菁菁 李建强 周伟 尚文韬 付学峥 周培松 王志伟 Li Xinxin;Xiao Peng;Ye Jingjing;Li Jianqiang;Zhou Wei;Shang Wentao;Fu Xuezheng;Zhou Peisong;Wang Zhiwei

作者机构：郑州大学第一附属医院疼痛科郑州450052 郑州大学第一附属医院骨科郑州450052 北京大学人民医院国家创伤医学中心北京100044 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2024年第41卷第5期

页      面：999-1002页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：河南省医学科技攻关计划联合共建项目(LHGJ20220356) "北京大学人民医院研究与发展基金"学术新星项目(RS2023-03) 

主　　题：失血性休克 急性肺损伤 细胞外信号调节激酶信号通路 趋化因子 中性粒细胞 

摘      要：目的:探讨失血性休克(HS)致急性肺损伤(ALI)中细胞外信号调节激酶(ERK)通路的改变及其抑制剂的保护作用。方法:SD大鼠分为假手术(Sham)组、HS 4 h组、HS 8 h组、干预组和溶剂对照组,每组6只。HS组和干预组采用股静脉插管定量失血建立模型,Sham组只进行手术操作。干预组和溶剂对照组在失血后20 min腹腔注射ERK蛋白磷酸化抑制剂司美替尼(Selumetinib)或等体积溶剂。细胞实验分为正常培养组、缺氧缺糖组(OGD)、Selumetinib干预组和溶剂对照组。使用肺组织苏木精-伊红(HE)染色、免疫组织化学染色、病理评估和炎性细胞计数评估肺组织损伤情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析趋化因子含量,采用蛋白质免疫印迹分析ERK蛋白磷酸化水平。两组之间统计比较使用非配对t检验或Welch’s t检验,多组间比较使用单因素方差分析(One-Way ANOVA)或Kruskal-Wallis检验,并采用Bonferroni post-hoc检验进行组间的两两比较。结果:HS 8 h组大鼠中性粒细胞(105.58±14.73)显著多于Sham组(25.12±5.48),差异有统计学意义(t=12.536,P0.05);HS 8 h组肺损伤评分[(0.682±0.089)分]显著高于Sham组[(0.175±0.083)分],差异有统计学意义(t=10.199,P0.05)。HS 4 h和HS 8 h组肺组织的CXCL1浓度和CXCL2浓度显著高于Sham组,差异有统计学意义(CXCL1:F=89.38,P0.01;CXCL2:χ^(2)=15.158,P0.01)。HS 4 h和HS 8 h组血清的CXCL1和CXCL2浓度显著多于假手术组,差异有统计学意义(CXCL1:χ^(2)=14.000,P0.01;CXCL2:χ^(2)=15.158,P0.01)。OGD培养肺上皮细胞(A549细胞)2、4、6 h后,IL-8、CXCL1和CXCL2含量显著增多(IL-8:χ^(2)=21.60,P0.01;CXCL1:F=341.043,P0.01;CXCL2:χ^(2)=17.78,P0.01),同时,ERK蛋白磷酸化水平逐渐显著增强(t=6.867,P0.05),Selumetinib显著抑制A549细胞趋化因子IL-8(t=10.497,P0.01)、CXCL1(t=10.631,P0.01)和CXCL2(t=5.504,P0.01)的分泌。动物实验中,Selumetinib抑制CXCL1/2分泌(P0.01)和中性粒细胞浸润(t=9.731,P0.01),减轻肺损伤(t=4.088,P0.01)。结论:失血性休克后,大鼠肺上皮细胞通过ERK通路,分泌趋化因子、募集中性粒细胞、加重肺损伤,抑制ERK蛋白磷酸化可显著抑制该过程,减轻肺损伤。